[發明專利]一種外泌體分泌培養基及臍帶間充質干細胞外泌體的培養分離方法有效
| 申請號： | 202110446820.3 | 申請日： | 2021-04-23 |
| 公開（公告）號： | CN112920996B | 公開（公告）日： | 2023-05-02 |
| 發明（設計）人： | 麥志國;劉元旦;陳群珍;尹麗珍 | 申請（專利權）人： | 廣州研華生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/0775 | 分類號： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人： | 黃燕 |
| 地址： | 511400 廣東省廣州市南*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 外泌體 分泌 培養基 臍帶 間充質 干細胞 培養 分離 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種外泌體分泌培養基，其特征在于，其以無血清干細胞培養基為基礎培養基，添加以下組分：200ng/ml的EGF、150ng/ml的TGF、30μg/ml的輔酶Q10、600μg/ml的鉀鹽、0.6μg/ml的果糖二磷酸鈉和300μg/ml的組胺二鹽酸鹽；所述鉀鹽為：氯化鉀溶于磷酸二氫鉀緩沖液和磷酸氫二鉀緩沖液的混合鹽溶液，所述磷酸二氫鉀緩沖液和磷酸氫二鉀緩沖液的總濃度為0.01mol/L，pH為7.4，所述氯化鉀在混合鹽溶液中的濃度為1g/L；
所述無血清干細胞培養基以D-MEM培養基和人血白蛋白為基礎培養基，所述無血清干細胞培養基含質量濃度為5％-10%的人血白蛋白。
2.臍帶間充質干細胞外泌體的培養方法，其特征在于，其包括如下步驟：將臍帶間充質干細胞傳代培養至第三代后，去除培養基，清洗細胞后加入權利要求1所述的外泌體分泌培養基進行培養。
3.根據權利要求2所述的臍帶間充質干細胞外泌體的培養方法，其特征在于，加入外泌體分泌培養基后每間隔1-3天更換一次所述外泌體分泌培養基，并收集每次更換后的培養液。
4.根據權利要求3所述的臍帶間充質干細胞外泌體的培養方法，其特征在于，更換培養基前，對臍帶間充質干細胞總細胞數進行計數，每100萬個加入10-20ml外泌體分泌培養基。
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