[發明專利]一種用于提取核酸和PCR檢測的微流控芯片及其應用有效
| 申請號: | 202110408434.5 | 申請日: | 2021-04-16 |
| 公開(公告)號: | CN113244970B | 公開(公告)日: | 2022-07-19 |
| 發明(設計)人: | 楊宇;賴天然;齊潤姿;周永運;聶聰 | 申請(專利權)人: | 中國檢驗檢疫科學研究院 |
| 主分類號: | B01L3/00 | 分類號: | B01L3/00;C12M1/40;C12M1/38;C12M1/00;C12Q1/6806;C12Q1/686 |
| 代理公司: | 北京中濟緯天專利代理有限公司 11429 | 代理人: | 楊永莉 |
| 地址: | 100176 北京市*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 用于 提取 核酸 pcr 檢測 微流控 芯片 及其 應用 | ||
1.一種用于提取核酸和PCR檢測的微流控芯片,其特征在于,其包括核酸提取反應倉、純化反應倉和PCR反應倉,核酸提取反應倉和純化反應倉的前端均連接有帶有兩分支進液倉,后端連通一個取液倉,PCR反應倉前端連通一個三分支進液倉,后端連通一個取液倉;
所述核酸提取反應倉、純化反應倉制成一個芯片,PCR反應倉在另一芯片上,PCR反應倉設有一個或多個。
2.如權利要求1所述的微流控芯片,其特征在于,所述核酸提取反應倉、純化反應倉、PCR反應倉的倉室體積大小為5~10μL。
3.如權利要求1所述的微流控芯片,其特征在于,所述核酸提取反應倉、純化反應倉、PCR反應倉的形狀為圓柱形倉室或方形倉室。
4.如權利要求1-3中任一項所述微流控芯片的使用方法,其特征在于,其包括細胞在芯片外裂解獲得裂解后的樣本液體,通過毛細管進入進液倉中,進液倉中裂解后的樣本液體加入已經預埋好磁珠的核酸提取反應倉內,進行磁珠吸附,吸附后用buffer或者純水在外加磁場固定磁珠情況下沖洗;如需要洗脫核酸加洗脫液,將含磁珠-核酸的沖洗液通過毛細管移入連通純化反應倉的進液倉中,純化反應倉通過另一分支的進液倉加入洗脫液進行洗脫;如果不需洗脫就直接將吸附核酸的磁珠運送到PCR反應倉,洗脫核酸后將核酸通過取液倉運送到PCR反應倉的進液倉,進入PCR反應倉,在連通PCR反應倉的另兩個分支的進液倉中加入PCR反應液及酶,在PCR反應倉進行PCR反應,反應后通過PCR反應倉的取液倉移出PCR擴增產物;
所述核酸提取反應倉內還含有高鹽低pH溶液下核酸吸附液,純化反應倉內含有的洗脫液為低鹽高pH溶液,將核酸洗脫下來,進入溶液中。
5.如權利要求4所述的使用方法,其特征在于,所有溶液的吸入與吸出由MFCS型壓力驅動型微流體控制系統控制。
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