[發明專利]一種煙草青枯病菌快速免疫檢測試紙條及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202110407113.3
• 申請日: 2021-04-15
• 公開（公告）號: CN113189331B
• 公開（公告）日: 2023-07-18
• 發明（設計）人: 王曉強;袁源;王鳳龍;任廣偉;王東坤;李藝池;王文靜
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院煙草研究所(中國煙草總公司青州煙草研究所)
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/577;G01N33/58;G01N33/558;G01N33/532
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 宋海海

1.一種煙草青枯病菌快速免疫檢測試紙條，其特征在于，所述試紙條包含抗煙草青枯病菌單克隆抗體，其中，所述抗煙草青枯病菌單克隆抗體的重鏈可變區包含如SEQ?ID?NO.1所示的氨基酸序列，其輕鏈可變區包含如SEQ?ID?NO.2所示的氨基酸序列。

2.如權利要求1所述的試紙條，其特征在于，所述煙草青枯病菌快速免疫檢測試紙條包括：底板，所述底板上依次設置有吸水墊、檢測墊、金標墊和樣品墊，相鄰各墊在連接處交疊連接。

3.如權利要求2所述的試紙條，其特征在于，所述檢測墊以硝酸纖維素膜為基墊，硝酸纖維素膜上依次設置質控線和檢測線，所述檢測線上包被有抗煙草青枯病菌多克隆抗體，所述質控線上包被有羊抗小鼠IgG；

所述金標墊上噴涂有納米金標記的抗煙草青枯病菌單克隆抗體。

4.如權利要求2所述的試紙條，其特征在于，所述吸水墊長度控制為15-20mm，寬度控制為3-5mm；檢測墊長度控制為20-25mm，寬度控制為3-5mm；金標墊長度控制為3-7mm，寬度控制為3-5mm；樣品墊長度控制為20-25mm，寬度控制為3-5mm，相鄰各墊的交疊長度控制為3-6mm；或，

所述檢測墊上的質控線與檢測線的間距控制為3-6mm，檢測線與硝酸纖維素膜上沿之間的間距為13-18mm。

5.如權利要求2所述的試紙條，其特征在于，所述金標墊中所用的納米金粒徑控制為30-50nm；所述金標墊上每厘米噴涂長度所需的納米金標記的抗煙草青枯病菌單克隆抗體的用量為80-120ng；檢測墊檢測線上每厘米噴涂長度所需的抗煙草青枯病菌多克隆抗體的用量為80-120ng。

6.權利要求1-5任一項所述煙草青枯病菌快速免疫檢測試紙條的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括：將抗煙草青枯病菌單克隆抗體加入到納米金中，獲得納米金標記的抗煙草青枯病菌單克隆抗體，并噴涂至金標墊上。

7.如權利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述制備方法還包括：在底板上按順序粘貼上吸水墊、檢測墊、金標墊和樣品墊，組裝形成試紙條。

8.如權利要求7所述的制備方法，其特征在于，檢測墊以硝酸纖維素膜為基墊，硝酸纖維素膜上依次設置質控線和檢測線，所述檢測線上包被有抗煙草青枯病菌多克隆抗體，所述質控線上包被有羊抗小鼠IgG。

9.權利要求1-5任一項所述試紙條在煙草青枯病菌檢測中的應用。

10.一種快速檢測煙草青枯病菌的方法，其特征在于，所述方法包括：采用權利要求1-5任一項所述試紙條對待測樣品進行檢測，分析檢測結果。