[發(fā)明專利]一種用于檢測TNNC1基因突變的引物探針組合物及其應(yīng)用

有效

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• 申請日: 2021-04-14
• 公開（公告）號: CN112941172B
• 公開（公告）日: 2022-05-31
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 趙躍;張世梅
• 申請（專利權(quán)）人: 大理大學(xué)
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

1.一種用于檢測TNNC1基因突變的引物探針組合物，其特征在于，所述引物探針組合物包括檢測位置對應(yīng)編號為GenBank:NG_008963.1的TNNC1基因第5045位堿基的突變位點c.19GC的引物和探針；

所述引物的核酸序列如SEQ ID NO.1～2所示；

所述探針包括野生型探針和突變型探針；

所述野生型探針的核酸序列如SEQ ID NO.3所示；

所述突變型探針的核酸序列如SEQ ID NO.4所示。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的引物探針組合物，其特征在于，所述探針為Taqman探針。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的引物探針組合物，其特征在于，所述Taqman探針的核酸序列5’端標(biāo)記有熒光基團。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的引物探針組合物，其特征在于，所述Taqman探針的核酸序列3’端標(biāo)記有淬滅基團。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的引物探針組合物，其特征在于，所述熒光基團包括FAM或HEX。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的引物探針組合物，其特征在于，所述淬滅基團包括MGB。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的引物探針組合物，其特征在于，所述野生型探針的核酸序列5’端標(biāo)記的熒光基團與所述突變型探針5’端標(biāo)記的熒光基團不同。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的引物探針組合物，其特征在于，所述野生型探針的核酸序列5’端標(biāo)記的熒光基團為FAM。

9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的引物探針組合物，其特征在于，所述突變型探針的核酸序列5’端標(biāo)記的熒光基團為HEX。

10.一種檢測TNNC1基因突變的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括權(quán)利要求1-9任一項所述的用于檢測TNNC1基因突變的引物探針組合物。

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括PCR反應(yīng)液和/或染料。

12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的試劑盒，其特征在于，所述PCR反應(yīng)液包括DNA聚合酶、Mg²⁺緩沖液、dNTPs和水。

13.根據(jù)權(quán)利要求11所述的試劑盒，其特征在于，所述染料包括Rox校正染料。

14.根據(jù)權(quán)利要求10所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括質(zhì)控品。

15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的試劑盒，其特征在于，所述質(zhì)控品包括野生型質(zhì)控品、突變型質(zhì)控品和雜合突變型質(zhì)控品。

16.一種權(quán)利要求10所述的檢測TNNC1基因突變的試劑盒以非疾病診斷和/或治療為目的的使用方法，其特征在于，所述方法包括：

提取基因組，以基因組為模板，采用所述檢測TNNC1基因突變的試劑盒進行實時熒光PCR檢測，分析結(jié)果。

17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的方法，其特征在于，所述基因組來自于人的外周血、心肌組織、淋巴器官、脾臟、骨髓或肝臟中的任意一種或至少兩種的組合。

18.根據(jù)權(quán)利要求16所述的方法，其特征在于，所述實時熒光PCR檢測的反應(yīng)條件包括：93～98℃預(yù)變性25～35s；93～98℃變性3～7s、63～65℃退火及延伸30～40s，35～45個循環(huán)；59～61℃延伸1～3min。

19.根據(jù)權(quán)利要求16-18任一項所述的方法，其特征在于，所述方法包括：

提取基因組，以基因組為模板，采用所述檢測TNNC1基因突變的試劑盒進行實時熒光PCR檢測，檢測反應(yīng)條件包括：93～98℃預(yù)變性25～35s；93～98℃變性3～7s、63～65℃退火及延伸30～40s，35～45個循環(huán)；59～61℃延伸1～3min，分析結(jié)果。