[發(fā)明專利]鸚鵡熱衣原體多型外膜蛋白PmpG蛋白的制備方法和應用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110394222.6 | 申請日: | 2021-04-13 |
| 公開(公告)號: | CN113087778B | 公開(公告)日: | 2022-08-16 |
| 發(fā)明(設計)人: | 何誠;李強;隋卓君;王藝暉;李小慧 | 申請(專利權)人: | 中國農業(yè)大學 |
| 主分類號: | C07K14/295 | 分類號: | C07K14/295;C12N15/31;C12N15/81;A61K39/118;A61K39/39;A61P31/04;G01N33/569;G01N33/68;C12R1/865 |
| 代理公司: | 北京智為時代知識產權代理事務所(普通合伙) 11498 | 代理人: | 王加嶺;楊靜 |
| 地址: | 100193 *** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 鸚鵡 衣原體 多型外 膜蛋白 pmpg 蛋白 制備 方法 應用 | ||
1.具有免疫原性的禽鸚鵡熱衣原體多型外膜蛋白PmpG蛋白組合物,其特征在于,其包括Pmp 17G、Pmp19G、Pmp20G和Pmp21G,其具有反應原性的蛋白包括Pmp17G和Pmp19G,Pmp17G蛋白的氨基酸序如SEQ ID NO.1所示,Pmp19G蛋白的氨基酸序如SEQ ID NO.2所示,Pmp20G蛋白的氨基酸序如SEQ ID NO.3所示,Pmp21G蛋白的氨基酸序如SEQ ID NO.4所示。
2.制備權利要求1所述的具有免疫原性的禽鸚鵡熱衣原體多型外膜蛋白PmpG蛋白組合物的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:
PCR方法擴增如SEQ ID NO.5-8所示的鸚鵡熱衣原體Pmp17G、Pmp19G、Pmp20G、Pmp21G基因;
將Pmp17G、Pmp19G、Pmp20G、Pmp21G基因分別導入釀酒酵母CEN.PK2株進行同源重組;再經過大腸桿菌分別表達,分別表達獲得Pmp17G、Pmp19G、Pmp20G、Pmp21G蛋白。
3.用于預防和控制禽類衣原體感染的聯合疫苗,其特征在于,所述聯合疫苗包括Pmp17G、Pmp19G、Pmp20G、Pmp21G蛋白,所述Pmp17G蛋白的氨基酸序如SEQ ID NO.1所示,Pmp19G蛋白的氨基酸序如SEQ ID NO.2所示,Pmp20G蛋白的氨基酸序如SEQ ID NO.3所示,Pmp21G蛋白的氨基酸序如SEQ ID NO.4所示。
4.根據權利要求3所述的聯合疫苗,其特征在于,所述聯合疫苗制備方法為每羽份包含Pmp17G、Pmp19G、Pmp20G、Pmp21G蛋白各50μg,每只家禽免疫的抗原含量為200μg。
5.根據權利要求3的聯合疫苗,其特征在于,以殼聚糖凝膠為免疫佐劑,每只家禽疫苗的添加劑量為0.2mL,混合均勻。
6.根據權利要求3的聯合疫苗,其特征在于,所述聯合疫苗通過呼吸道接種,替代注射免疫途徑。
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