[發明專利]用于治療腫瘤的壁蛻膜間充質干細胞培養基、共培方法

有效

• 申請號: 202110392393.5
• 申請日: 2021-04-13
• 公開（公告）號: CN113322228B
• 公開（公告）日: 2022-08-19
• 發明（設計）人: 劉小翠;唐淑艷;鄧燕蓮;蒙燕瑤;雅思敏;楊景利;王進輝
• 申請（專利權）人: 廣東唯泰生物科技有限公司
• 主分類號: C12N5/0775
• 分類號: C12N5/0775;C12N5/09;A61P35/00;A01N1/02
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 李素蘭;何鍵云

本發明公開了用于治療腫瘤的壁蛻膜間充質干細胞培養基、共培方法，所述用于治療腫瘤的壁蛻膜間充質干細胞培養基含有壁蛻膜間充質干細胞和選擇培養基，所述壁蛻膜間充質干細胞對多種腫瘤細胞具有歸巢作用、抑制增殖作用和調節細胞周期作用。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，尤其涉及一種用于治療腫瘤的壁蛻膜間充質干細胞培養基、共培方法。

背景技術

間充質干細胞(mesenchymal stem cell，MSC)是具有趨化腫瘤能力的多能干祖細胞，在腫瘤方面的研究有著顯著的進展。但子宮來源間充質干細胞對婦科惡性腫瘤細胞生物學行為的影響報道不一，研究壁蛻膜MSCs(Pariduval Mesenchymal stem cell，PMSCs)與腫瘤的適配性和選擇性成為臨床上治療腫瘤的新方法。

壁蛻膜間充質干細胞(Pariduval Mesenchymal stem cells，PMSCs)具有體外增殖培養簡單、不觸及道德倫理學、具有良好的遷移能力、向腫瘤細胞歸巢和低免疫原性等特點，并規避了骨髓間充質干細胞獲取困難、涉及醫學道德倫理等風險，使其可以成為替代骨髓間充質干細胞成為腫瘤生物治療的新載體。但研究報道的母源間充質干細胞對惡性腫瘤細胞生物學行為的影響不一，研究PMSCs與多種惡性腫瘤的適配性和選擇性，是PMSCs能否成為惡性腫瘤治療載體的基礎。

現有壁蛻膜間充質干細胞對不同婦科腫瘤的增殖抑制作用的不足有：

1、在相關文獻的MSCs與腫瘤的研究方法中，多見MSCs對單種腫瘤的作用，少見MSC的歸巢能力與腫瘤類型選擇性和適配性的直接分析；

2、在相關文獻中的MSCs與腫瘤的研究方法中，常見經改造的間充質干細胞與藥物組合后作用于腫瘤的研究，對母源的壁蛻膜間充質干細胞與腫瘤的研究不足；

3、在相關文獻中的共培養方法中，PMSCs使用的研究濃度單一，造成對惡性腫瘤細胞生物學行為的影響報道不一。

發明內容

本發明所要解決的技術問題在于，提供了一種用于治療腫瘤的壁蛻膜間充質干細胞培養基，用于在腫瘤治療中的應用，所述壁蛻膜間充質干細胞培養基含有壁蛻膜間充質干細胞和選擇培養基，所述壁蛻膜間充質干細胞對多種腫瘤細胞具有歸巢作用、抑制增殖作用和調節細胞周期作用。

本發明還要解決的技術問題在于，提供了壁蛻膜間充質干細胞培養基與腫瘤細胞的共培養方法，明確壁蛻膜間充質干細胞對惡性腫瘤歸巢作用的適配性和選擇作用，使得共培養后間充質干細胞歸巢作用軌跡明顯，明確特定濃度范圍內壁蛻膜間充質干細胞對不同惡性腫瘤的歸巢作用。

本發明還要解決的技術問題在于，提供了用于治療腫瘤的壁蛻膜間充質干細胞培養基，用于在腫瘤治療中的應用，所述用于治療腫瘤的壁蛻膜間充質干細胞培養基含有壁蛻膜間充質干細胞和選擇培養基，所述壁蛻膜間充質干細胞對多種腫瘤細胞具有歸巢作用、抑制增殖作用和調節細胞周期作用。

作為上述方案的改進，所述腫瘤為宮頸腫瘤、乳腺腫瘤或肺腫瘤。

作為上述方案的改進，所述壁蛻膜間充質干細胞的制備方法，包括以下步驟：

S11、將壁蛻膜組織剪成1～4mm³的組織塊，用組織清洗液清洗組織塊；

S12、清洗后用組織消化液在恒溫振蕩下消化組織塊，終止消化，過濾，離心，保留沉淀，所述組織消化液為含有體積濃度40～60％Tryple-EDTA酶和8～12mg/mlⅡ型膠原酶的高糖DMEM培養基；

S13、用生理鹽水清洗沉淀并將沉淀重懸，離心，去除上清液，加入選擇培養基重懸，得到PMSCs懸液；

S14、將PMSCs懸液接種至培養瓶中，在培養箱中進行原代培養，計為P0代；