[發(fā)明專利]新型大環(huán)內(nèi)酯化合物acautalides A-C及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110388794.3
• 申請日: 2021-04-12
• 公開（公告）號: CN114591286B
• 公開（公告）日: 2023-05-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 譚仁祥;童志武;戈惠明
• 申請（專利權(quán)）人: 南京大學(xué)
• 主分類號: C07D321/00
• 分類號: C07D321/00;A61P25/16;A61P25/00;C12P17/08;C12R1/645
• 代理公司: 江蘇銀創(chuàng)律師事務(wù)所 32242
• 代理人: 何震花

本發(fā)明公開了新型大環(huán)內(nèi)酯化合物acautalides?A?C及其制備方法和應(yīng)用。三者都是真菌Acaulium?sp.H?JQSF(CCTCC?No：M2021342H?JQSF)合成的，其化學(xué)結(jié)構(gòu)如式(I)所示：生物學(xué)活性測試表明，這些新型大環(huán)內(nèi)酯能修復(fù)多巴胺神經(jīng)元的損傷，其中acautalides?A和B效果更為顯著，可作為研發(fā)新藥的先導(dǎo)化合物，用于帕金森等神經(jīng)損傷類疾病的治療。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及無莖真菌屬Acaulium?sp.H-JQSF等菌株產(chǎn)生的三種新型大環(huán)內(nèi)酯(被發(fā)明人命名為：acautalides?AC)及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

帕金森病也稱震顫麻痹，其發(fā)生發(fā)展步驟包括：中腦黑質(zhì)致密區(qū)多巴胺能神經(jīng)元丟失、導(dǎo)致紋狀體中多巴胺含量降低，造成乙酰膽堿系統(tǒng)功能相對亢進(jìn)，從而引起神經(jīng)系統(tǒng)的變性或變病。此病目前有些治療方法和手段，包括藥物治療、手術(shù)治療、運(yùn)動治療、心理疏導(dǎo)及照料護(hù)理等，但最重要且貫穿疾病全過程的手段依然是藥物治療。但現(xiàn)有療法只能改善癥狀，不能阻止病情發(fā)展，可謂治標(biāo)不治本。因此，尋找可治療帕金森病的新藥尤為重要。

天然產(chǎn)物是生物為適應(yīng)環(huán)境、競爭拮抗、化學(xué)感應(yīng)、抵御外侵、傳遞信號等目的產(chǎn)生的小分子化合物。其生物合成誘因復(fù)雜、結(jié)構(gòu)與功能事先難料，一直被認(rèn)為是新藥發(fā)現(xiàn)的重要源泉。

真菌資源豐富，生物合成能力強(qiáng)，是青霉素等抗感染藥物的重要源頭，但至今未見真菌產(chǎn)生的抗帕金森等神經(jīng)退行性疾病的藥物。發(fā)明人通過廣泛篩選，發(fā)現(xiàn)Acauliumsp.H-JQSF?等真菌可產(chǎn)結(jié)構(gòu)全新的、能抗此病的系列大環(huán)內(nèi)酯，急需對它們的來源、制備和用途予以專利保護(hù)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有棘手醫(yī)學(xué)難題，而提出對新型大環(huán)內(nèi)酯化合物acautalides?A-C及其制備方法和應(yīng)用予以保護(hù)。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用了如下技術(shù)方案：本發(fā)明的新型大環(huán)內(nèi)酯化合物acautalides?A-C，所述的新型大環(huán)內(nèi)酯化合物acautalides?A-C的化學(xué)結(jié)構(gòu)式如式(I)所示：

本發(fā)明所述的新型大環(huán)內(nèi)酯化合物acautalides?A-C的制備方法，包括如下步驟：

(1)將真菌Acaulium?sp.H-JQSF菌株，采用PDA平板發(fā)酵培養(yǎng)；

(2)將步驟(1)所得培養(yǎng)物切塊，放入大米等組成的培養(yǎng)基中，30±5℃靜置培養(yǎng)25-35?天；

(3)將步驟(2)所得培養(yǎng)基采用乙酸乙酯等有機(jī)溶劑萃取，濃縮得到浸粗膏F1；

(3)對浸粗膏F1進(jìn)行硅膠柱層析，先采用石油醚和乙酸乙酯等溶劑混合物洗脫，再用二氯甲烷和甲醇等溶劑混合物洗脫，共獲得14個組分；

(4)再將這些組分，反復(fù)用反向硅膠、凝膠柱層析和HPLC分離純化，制得三種新型大環(huán)內(nèi)酯，命名為acautalides?A-C。

進(jìn)一步地，在步驟(1)中，PDA平板發(fā)酵培養(yǎng)的培養(yǎng)條件為26～30℃培養(yǎng)5-7天。

進(jìn)一步地，在步驟(4)中，HPLC色譜條件為：使用反相色譜柱，流動相A：水，流動相B：乙腈，等度洗脫程序為：流動相A的質(zhì)量百分比為5％，流動相B的質(zhì)量百分比為95％，時間為25分鐘；HPLC分離純化過程如下：HPLC半制備反相高效液相色譜：ODS-2Hypersil?柱，流動相為：乙腈和水的體積比為19：1，以2mL/min流速梯度洗脫25分鐘；泵的型號可以為Hitachi?pump?L-7100，紫外燈的型號可以為UV?detector?L-7400。