[發明專利]一種間充質干細胞制劑及其應用

在審

• 申請號: 202110376297.1
• 申請日: 2021-04-08
• 公開（公告）號: CN113512525A
• 公開（公告）日: 2021-10-19
• 發明（設計）人: 沈萍萍;孫璐琛;楊南飛;鄭薇;左詩曼
• 申請（專利權）人: 南京大學
• 主分類號: C12N5/0775
• 分類號: C12N5/0775;A61K35/28;A61P35/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種間充質干細胞活化劑的成分與配伍：

10％胎牛血清的α-MEM培養基、0.5-10μM骨化三醇(1，25-Dihydroxyvitamin D3，1，25D3)，1-10μM積雪草苷，0.1-1μM羅格列酮(rosiglitazone)，2-10mM二甲雙胍，0.5-2mM維生素C及0.5-1.5μM丙酮酸鈉。在一些實施方式中，藥用輔料可包括：磷酸緩沖鹽溶液(phosphate buffer saline，PBS)，0.9％的氯化鈉水溶液，吐溫-20(Tween-20)，二甲基亞砜(DMSO)。

2.一種間充質干細胞制劑：使用間充質干細胞活化劑對提取獲得的間充質干細胞進行孵育，制備誘導型活化間充質干細胞(Active MSCs)3.一種間充質干細胞制劑在免疫系統疾病中的應用。

3.一種間充質干細胞制劑在自身免疫性疾病治療、急性髓系白血病治療、預防衰老，增加機體免疫力以及促進機體組織再生方面中的應用。

4.根據權利要求1中所述的間充質干細胞活化劑，可以使用活化劑成分中的任意一種或幾種，制備Active MSCs。間充質干細胞活化劑的成分與配伍，其中，任一成分可替換成其它同系或同類型效應化合物，具體包括：

(1)1，25D3可替換為：阿法骨化醇(25(OH)₂D3)、帕立骨化醇、度骨化醇、氟骨化醇以及馬沙骨化醇等。

(2)羅格列酮可替換為：曲格列酮(troglitazone)、吡格列酮(pioglitazone)、環格列酮(ciglitazone)等噻唑烷二酮藥物(TZDs)。

(3)二甲雙胍可替換為：尿囊素和人參皂苷

(4)CDDO可替換為：齊墩果酸，CDDO-Me，CDDO-imidazolide，CDDO乙基酯。

5.根據權利要求2中所述的間充質干細胞制劑，其中所述的間充質干細胞(MSCs)是人臍帶來源間充質干細胞(UC-MSCs)，或人骨髓來源間充質干細胞(BM-MSCs)，或人脂肪組織來源間充質干細胞(ADSCs)中的任意一種或幾種。

6.根據權利要求2中所述的間充質干細胞制劑，其中的非細胞組分包括活化劑成分與藥用輔料成分；活化劑成分為權利要求1中的活化劑組分的所有成分，或任意一種，或任意幾種的配伍。制劑制備可包含以下三種：

(1)使用權利要求1中活化劑處理MSCs，制備獲得的Active MSCs，并與藥用輔料進行混合，制備干細胞制劑。

(2)使用權利要求1中活化劑處理MSCs，制備獲得的Active MSCs；將獲得的ActiveMSCs與活化劑以及藥用輔料進行混合，制備干細胞制劑。

(3)MSCs與權利要求1中的活化劑直接混合，并于藥用輔料混合，制備干細胞制劑。

7.根據權利要求3中的應用，Active MSCs需符合以下標準：

(1)細胞表面標志物：CD14，CD34，CD45陰性表達；CD73，CD90，CD105陽性表達。

(2)三譜系(成骨、成軟骨、成脂)分化特征

(3)分泌因子：白介素6，(IL6)，吲哚胺2，3加雙氧酶(IDO)，骨形成蛋白6(BMP6)，中性粒細胞彈性蛋白酶，組織蛋白酶G，超氧化物歧化酶，組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)，蛋白質賴氨酸6氧化酶(LOX)，IGFL3，TNFAIP6，CYR61，TGFβ。

8.根據權利要求7中的標準，分泌因子應認定為該間充質干細胞制劑發揮疾病治療與預防功能的功能活性因子。功能活性因子應為權利要求11中的任意一種或多種的組合。在一些實施方式中，通過在間充干細胞中使用基因編輯或藥物誘導的方式促進本發明中所述的分泌因子的上調表達或釋放的方式應認定為本發明的所述范圍。