[發(fā)明專利]測定葉片中莠去津、吡蟲啉及其代謝物的液相色譜質譜法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110375744.1
• 申請日: 2021-04-08
• 公開（公告）號: CN112858542B
• 公開（公告）日: 2023-09-15
• 發(fā)明（設計）人: 李麗君;趙江華;王海嬌;馬健生;陳婷玉;趙愛林;何煉;趙恩好
• 申請（專利權）人: 中國地質調查局沈陽地質調查中心
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 天津盛理知識產權代理有限公司 12209
• 代理人: 趙瑤瑤

1.一種測定植物葉片中莠去津、吡蟲啉及其代謝物的液相色譜質譜法，其特征在于，吡蟲啉的代謝物為吡蟲啉胍、吡蟲啉脲、吡蟲啉烯、6-氯煙酸；所述測定植物葉片中莠去津、吡蟲啉及其代謝物的液相色譜質譜法包括：

利用QuEChERS方法，對植物葉片中莠去津、吡蟲啉及其代謝物，殘留測定過程中的各種影響因素進行分析；并結合HPLC-MS-MS法對所述莠去津、吡蟲啉及其代謝物的含量進行檢測；

所述測定植物葉片中莠去津、吡蟲啉及其代謝物的液相色譜質譜法具體包括：

步驟一，提取與凈化：稱取植物葉片于離心管中，加入乙腈，漩渦混合，加入鹽析材料，漩渦混勻后，室溫超聲提取，離心；取上清液到離心管，加凈化劑無水硫酸鈉，C18凈化，漩渦混勻，上清液過有機相微孔濾膜，吸取濾液用液相色譜質譜儀測定；

步驟二，液相色譜參考條件：色譜柱：Brownlee?SPP?C18，2.1×100mm，粒度2.7μm；柱溫：30℃；流速：0.4mL/min；樣品室溫度：8℃；流動相：A為0.1％(體積分數(shù))甲酸水溶液，B為乙腈；利用流動相梯度洗脫程序進行梯度洗脫；

所述步驟二中，流動相梯度洗脫程序如下：

流動相梯度洗脫程序如下：

步驟三，質譜分析條件：電離方式：ESI；正離子模式；檢測方式：MRM；反吹干燥氣流量100mL/min；熱表面誘導去溶劑。

2.如權利要求1所述的測定植物葉片中莠去津、吡蟲啉及其代謝物的液相色譜質譜法，其特征在于，所述步驟一中，漩渦混勻后，室溫超聲提取3min，于4000r/min離心5min；取上清液1.0mL到10mL離心管，加凈化劑150mg無水硫酸鈉，50mg?C?18凈化，漩渦混勻30s，上清液過0.22μm有機相微孔濾膜，吸取2.0μL濾液用液相色譜質譜儀測定。

3.如權利要求1所述的測定植物葉片中莠去津、吡蟲啉及其代謝物的液相色譜質譜法，其特征在于，所述步驟一進行前，需進行：

莠去津標準溶液配置：

吸取100μL的100μg/mL莠去津貯備液，用體積比為1:1的甲醇+水配制成10μg/mL的標準溶液；

吡蟲啉及代謝物的混合貯備液：

分別稱取一定量的吡蟲啉、吡蟲啉胍、吡蟲啉脲、吡蟲啉烯、6-氯煙酸，體積比為1：1的甲醇+水配制成2000μg/mL的貯備液；

吡蟲啉及代謝物的混合中間液：

吸取一定量的2000μg/mL的貯備液，體積比為1：1的甲醇+水逐級稀釋到100μg/mL和10μg/mL；

莠去津和吡蟲啉及其代謝物的混合標準貯備溶液：1.0μg/mL；

吸取一定量的莠去津及吡蟲啉及其代謝物混合中間液，用50％：50％甲醇水稀釋至1.0μg/mL；

基質空白溶液：

將綠蘿和棉花葉片的陰性樣品按照樣品處理得到的溶液。

4.如權利要求1所述的測定植物葉片中莠去津、吡蟲啉及其代謝物的液相色譜質譜法，其特征在于，所述步驟一進行前，還需進行：

試樣制備與保存：取代表性樣品100g，用粉碎機粉碎；混勻，均分成兩份作為試樣，分裝，密閉，于-18C保存。

5.如權利要求1所述的測定植物葉片中莠去津、吡蟲啉及其代謝物的液相色譜質譜法，其特征在于，所述步驟三后，還需進行：工作曲線的配制：

吸取一定量的1.0μg/ml莠去津、吡蟲啉及其代謝物混合標準溶液，用初始流動相95％：5％分別稀釋至5.0、10.0、50.0、100.0、200.0、500ng/mL。

6.如權利要求1所述的測定植物葉片中莠去津、吡蟲啉及其代謝物的液相色譜質譜法，其特征在于，所述步驟三后，還需進行：基質工作曲線的配制：

吸取一定量的1.0μg/ml莠去津、吡蟲啉及其代謝物混合標準溶液，用基質空白溶液及溶劑空白溶液，分別稀釋至5.0、10.0、50.0、100.0、200.0、500ng/mL。