[發明專利]高速逆流色譜分離純化何首烏葉乙酸乙酯相中黃酮類化合物的方法

有效

• 申請號: 202110372815.2
• 申請日: 2021-04-07
• 公開（公告）號: CN113402574B
• 公開（公告）日: 2023-03-14
• 發明（設計）人: 吳磊;吳靜;謝傳奇;徐敢珍;熊偉;曹明源
• 申請（專利權）人: 江西省科學院應用化學研究所;江西新世嘉農業科技有限公司
• 主分類號: C07H17/07
• 分類號: C07H17/07;C07H1/08
• 代理公司: 南昌豐擇知識產權代理事務所(普通合伙) 36137
• 代理人: 吳稱生

1.一種高速逆流色譜分離純化何首烏葉乙酸乙酯相 中黃酮類化合物的方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）何首烏葉乙酸乙酯相的制備

將何首烏葉干燥后，以75%、80%、85%、90%或95%濃度的乙醇為溶劑進行超聲提取，之后抽濾并合并濾液，進行真空減壓濃縮除去溶劑，得到何首烏葉乙醇提取物，之后加入乙酸乙酯和水進行多次萃取，將萃取完全后的乙酸乙酯相進行真空減壓濃縮去溶劑，得到何首烏葉乙酸乙酯相；

（2）高速逆流色譜分離純化

采用體積比為2:1~3:2~5:0.5的水-甲醇-乙酸乙酯-正己烷溶液為溶劑體系，將固定相以20~30 mL/min流速泵入高速逆流色譜儀，待所述固定相充滿整個柱子后，3~5mL/min 的流速泵入流動相，同時調節高速逆流色譜儀轉速至800~900rpm；待兩相溶劑體系在高速逆流柱中達到平衡時，將所述何首烏葉乙酸乙酯相溶于所述兩相溶劑體系，進樣濃度為5mg/mL~20mg/mL，進樣體積為10~30 mL，進行高速逆流色譜分離；在所述高速逆流色譜分離時，用波長200~300nm 的紫外檢測器檢測，以單個波峰為單位，從出峰開始進行收集直至峰消失為止停止收集，分別收集不同餾分進行減壓濃縮冷凍干燥，得到楊梅苷、槲皮苷、山柰酚-3-O-鼠李糖苷。

2.根據權利要求1所述的高速逆流色譜分離純化何首烏葉乙酸乙酯相中黃酮類化合物的方法，其特征在于所述步驟（2）中，所述的水-甲醇-乙酸乙酯-正己烷的體積比為2:1:3:0.5。

3.根據權利要求1所述的高速逆流色譜分離純化何首烏葉乙酸乙酯相中黃酮類化合物的方法，其特征在于，所述步驟（2）中，所述進行高速逆流色譜分離時，分離柱轉速為850rpm，流動相流速為5mL/min，紫外檢測器波長為254nm，進樣濃度為11mg/mL，進樣體積為10 mL。

4.根據權利要求1所述的高速逆流色譜分離純化何首烏葉乙酸乙酯相中黃酮類化合物的方法，其特征在于，所述步驟（1）中，超聲提取的固液比為1：10~1：20。

5.根據權利要求4所述的高速逆流色譜分離純化何首烏葉乙酸乙酯相中黃酮類化合物的方法，其特征在于，所述步驟（1）中，所述超聲提取的固液比為1：15，提取次數為2次。