[發明專利]胚胎干細胞外泌體在制備美白及抗衰老藥物或者化妝品中的用途

在審

• 申請號: 202110361059.3
• 申請日: 2021-04-02
• 公開（公告）號: CN113041208A
• 公開（公告）日: 2021-06-29
• 發明（設計）人: 彭菲;李靜
• 申請（專利權）人: 北京岳昊科技發展有限公司
• 主分類號: A61K8/99
• 分類號: A61K8/99;A61K8/64;A61Q19/08;A61Q19/02;A61K35/545;A61K38/16;A61P17/18;A61P17/00;C12N5/0735
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1.胚胎干細胞外泌體和多肽在制備美白和抗衰老的藥物中的用途；其中，胚胎干細胞外泌體分離自商用的胚胎干細胞細胞系，所述多肽為SEQ ID NO：1所示的多肽；其中，所述外泌體的制備方法如下：將胚胎干細胞H9在mTeSR1人ES/iPS細胞無飼養層完全培養基中在37℃、5％CO₂低氧培養箱中培養；等到細胞已長滿即可進行傳代，具體步驟如下：棄去培養液，用PBS洗滌1-2次，加入1.0ml胰酶消化液，37℃消化，加入雙倍的含10％血清的人ES/iPS細胞無飼養層完全培養基，終止消化并輕輕吹打細胞，使其變成單細胞懸液，將細胞收集于離心管中離心1000rpm/5min，棄上清，輕彈管底，將細胞彈散，加入新鮮的含10％血清和100ng/mL IFN-γ的人ES/iPS細胞無飼養層完全培養基，重懸細胞，進行傳代培養，傳代比例為1:2，傳代連續培養16h后收集上清；將細胞培養上清轉移至50mL離心管，300g離心10分鐘；留取上清，2000g離心15分鐘；留存上清，10000g離心30分鐘；將上清轉移至超速離心管中，并用天平配平，100000g離心70分鐘；棄上清，用經0.22μm濾器濾過的PBS重懸，并用天平配平，100000g離心70分鐘；棄上清，用PBS重懸外泌體；外泌體采用超濾離心管濃縮，即可得到外泌體。

2.胚胎干細胞外泌體和多肽在制備美白和抗衰老的化妝品中的用途；其中，胚胎干細胞外泌體分離自商用的胚胎干細胞細胞系，所述多肽為SEQ ID NO：1所示的多肽；其中，所述外泌體的制備方法如下：將胚胎干細胞H9在mTeSR1人ES/iPS細胞無飼養層完全培養基中在37℃、5％CO₂低氧培養箱中培養；等到細胞已長滿即可進行傳代，具體步驟如下：棄去培養液，用PBS洗滌1-2次，加入1.0ml胰酶消化液，37℃消化，加入雙倍的含10％血清的人ES/iPS細胞無飼養層完全培養基，終止消化并輕輕吹打細胞，使其變成單細胞懸液，將細胞收集于離心管中離心1000rpm/5min，棄上清，輕彈管底，將細胞彈散，加入新鮮的含10％血清和100ng/mL IFN-γ的人ES/iPS細胞無飼養層完全培養基，重懸細胞，進行傳代培養，傳代比例為1:2，傳代連續培養16h后收集上清；將細胞培養上清轉移至50mL離心管，300g離心10分鐘；留取上清，2000g離心15分鐘；留存上清，10000g離心30分鐘；將上清轉移至超速離心管中，并用天平配平，100000g離心70分鐘；棄上清，用經0.22μm濾器濾過的PBS重懸，并用天平配平，100000g離心70分鐘；棄上清，用PBS重懸外泌體；外泌體采用超濾離心管濃縮，即可的到外泌體。

3.如權利要求1或2所述的用途，其特征在于所述藥物或者化妝品中還含有抗氧化劑。

4.如權利要求1或2所述的用途，其特征在于所述藥物或者化妝品中還含有抗自由基抗氧化劑。

5.如權利要求2所述的用途，其特征在于所述化妝品為乳液形式。