[發明專利]一種釀酒酵母表達長效重組彈性蛋白及其在化妝品中的應用

在審

• 申請號: 202110357328.9
• 申請日: 2021-04-01
• 公開（公告）號: CN113061179A
• 公開（公告）日: 2021-07-02
• 發明（設計）人: 趙俊;王夢;劉潔;李誠茹;夏潔;吳博;蔣敏之
• 申請（專利權）人: 蕪湖英特菲爾生物制品產業研究院有限公司
• 主分類號: C07K14/78
• 分類號: C07K14/78;C12N15/12;C12N15/81;A61K8/64;A61Q19/08;C12R1/865
• 代理公司: 合肥市澤信專利代理事務所(普通合伙) 34144
• 代理人: 方榮肖

本發明公開了一種釀酒酵母表達長效重組彈性蛋白及其在化妝品中的應用，該長效重組彈性蛋白的核苷酸序列如Seq ID NO.1所示。該長效重組彈性蛋白的核苷酸序列由天然彈性蛋白的原始序列經酵母密碼子優化后得到的，主要是通過對關鍵六肽重復序列GVGVAP進行人工設計得到的。本發明提供的長效重組彈性蛋白具有良好的生物相容性、抗氧化活性和還原能力。該長效重組彈性蛋白與從動物組織和異體中提取的彈性蛋白相比的優勢在于其可溶性、無病毒隱患和排異反應低。且本發明提供的長效重組彈性蛋白與從動物組織和異體中提取的彈性蛋白相比的優勢在于其可溶性、無病毒隱患和排異反應低。

技術領域

本發明涉及新興生物醫學領域，尤其涉及一種釀酒酵母表達長效重組彈性蛋白，以及一種釀酒酵母表達長效重組彈性蛋白在化妝品中的應用。

背景技術

天然彈性蛋白是一種水溶性較低、無定形、疏水性強且廣泛交聯的細胞外基質蛋白。人的原彈性蛋白結構域特點為：富含非極性氨基酸，特別是甘氨酸、擷氨酸、脯氨酸和丙氨酸的疏水域，如GVGVAP六肽重復序列，該重復序列在人的原彈性蛋白中有5個；富含與交聯有關的賴氨酸和丙氨酸的親水域，這些區域通常由被兩到三個丙氨酸分隔開的賴氨酸組成，如AAAKAAKAA。彈性蛋白在皮膚、肺臟、韌帶和血管等組織中含量較高，并在維持組織彈性中發揮著重要作用。彈性蛋白及彈性蛋白多肽具有一定的抗氧化活性和還原能力，即具備抵御衰老、抗紫外線的能力，因此其在醫學美容、護膚領域具有廣闊的應用前景。

由于天然彈性蛋白的大分子性，對其原始序列直接進行異源困難。因此主要通過對關鍵六肽重復序列GVGVAP進行人工設計，異源表達后獲得長效重組彈性蛋白(elastin-like polypeptides，ELP)。ELP具有良好的生物相容性、一定的抗氧化活性和還原能力。ELP與從動物組織和異體中提取的彈性蛋白相比的優勢在于其可溶性、無病毒隱患和排異反應低。

發明內容

針對現有的技術問題：由于天然彈性蛋白的大分子性，對其原始序列直接進行異源困難，本發明提供一種釀酒酵母表達長效重組彈性蛋白及其在化妝品中的應用。

本發明采用以下技術方案實現：一種釀酒酵母表達長效重組彈性蛋白，該長效重組彈性蛋白的核苷酸序列如Seq ID NO.1所示。

作為上一步技術方案的改進，長效重組彈性蛋白的核苷酸序列是通過對關鍵六肽重復序列GVGVAP進行人工設計得到的。

作為上一步技術方案的改進，長效重組彈性蛋白的核苷酸序列是由天然彈性蛋白的原始序列經酵母密碼子優化后得到的；長效重組彈性蛋白的核苷酸序列包括Not I酶切位點、Xba I酶切位點、起始密碼子、終止密碼子及6×His標簽序列。

進一步地，Not I酶切位點的核苷酸序列為GCGGCCGC。

進一步地，Xba I酶切位點的核苷酸序列為TCTAGA。

進一步地，起始密碼子的核苷酸序列為ATG。

進一步地，終止密碼子的核苷酸序列為TAA。

進一步地，6×His標簽序列為：CATCACCATCACCATCAC。

作為上一步技術方案的改進，長效重組彈性蛋白的核苷酸序列所對應的氨基酸序列如Seq ID NO.2所示。

本發明還提供一種釀酒酵母表達長效重組彈性蛋白在化妝品中的應用，其采用如上任意一項所述的釀酒酵母表達長效重組彈性蛋白。

本發明具有以下有益效果：

1、本發明通過對關鍵六肽重復序列GVGVAP進行人工設計，異源表達后獲得長效重組彈性蛋白。

2、本發明提供的長效重組彈性蛋白具有一定的抗氧化活性和還原能力。長效重組彈性蛋白與從動物組織和異體中提取的彈性蛋白相比的優勢在于其可溶性、無病毒隱患和排異反應低。