[發明專利]一種用于皮膚創傷修復的可注射復合殼聚糖水凝膠的制備方法

在審

• 申請號: 202110347207.6
• 申請日: 2021-03-31
• 公開（公告）號: CN113069412A
• 公開（公告）日: 2021-07-06
• 發明（設計）人: 胡巧玲;姜質琦;董曉飛
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: A61K9/06
• 分類號: A61K9/06;A61K31/155;A61K33/38;A61K35/28;A61K35/35;A61K35/36;A61K35/545;A61K38/18;A61K45/06;A61K47/36;A61P17/02;C08J3/075;C08L51/02;C08F251
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 萬尾甜;韓介梅

本發明涉及一種用于皮膚創傷修復的可注射復合殼聚糖水凝膠的制備方法，該水凝膠主要由改性殼聚糖、內載細胞以及生物活性因子組成。首先通過乳液聚合制備得到水凝膠前體溶液，主要成分為聚N?異丙基丙烯酰胺接枝改性的殼聚糖大分子，該水凝膠能在室溫環境下呈溶液狀態，在人體生理溫度環境下實現快速凝膠化。通過與細胞懸液和生物活性因子的混合，所得復合溶液可以在皮膚創傷缺損部位實現原位快速凝膠化，實現細胞原位固定，不僅可以為損傷部位提供良好的支撐，還可以促進其內部細胞的粘附、增殖、分化。由于制備簡單、使用方便、響應迅速、生物相容性良好，該水凝膠可用于組織修復、藥物控釋、細胞培養、癌癥治療等諸多生物醫學相關領域。

技術領域

本發明涉及一種殼聚糖基可注射水凝膠，尤其涉及一種用于皮膚創傷修復的可注射復合殼聚糖水凝膠的制備方法。

背景技術

皮膚是包在身體表面，直接同外界環境接觸，具有保護、排泄、調節體溫和感受外界刺激等作用的一種器官，是人體中最大的器官。皮膚由多種細胞和組織構成，具有多層復雜結構，其每層的組成和功能都不盡相同。由外傷或燒傷等原因引起的皮膚損傷修復，特別是深度的全皮膚創傷，會導致皮膚的多層結構被破壞，多種細胞及蛋白大量流失。在避免細菌、真菌等病原體黏附擴增使組織感染的前體下，如何有效地使細胞在皮膚損傷部位富集、增殖、分化，促進皮膚損傷修復，恢復皮膚原來的形態及功能，一直是臨床醫學的一大難題。

理想的皮膚創傷修復再生材料不僅需要合適的力學強度在皮膚損傷部位提供短期支撐，還應該促進細胞黏附、增殖、分化、礦化。水凝膠材料具有高含水量、與細胞外基質相似的結構、可調控的力學性能，使其在創傷修復方面有著良好的應用前景。與傳統水凝膠相比，智能水凝膠因其能對外界環境變化產生響應而受到更多關注。溫度敏感水凝膠是一種對外界溫度變化產生響應的水凝膠，具有可注射性，溫敏水凝膠中親水基團與疏水基團的存在，可以使溫敏凝膠在溫度改變時發生相轉變，由液態轉變為固態。具有良好生物相容性的溫敏可注射水凝膠可以在組織修復領域發揮極大地作用。

殼聚糖是一種天然氨基多糖，來源于生物體，是蝦殼、螃蟹殼的重要組成部分。殼聚糖不僅來源廣泛，還具有優異的生物相容性、抑菌性以及良好的生物可降解性。溫敏殼聚糖水凝膠兼具水凝膠的特點和優良的本征屬性，為皮膚創傷修復提供了新思路和新方法。

發明內容

本發明的目的在于針對現有技術的不足，提供一種用于皮膚創傷修復的可注射復合殼聚糖水凝膠的制備方法。本發明的用于皮膚創傷修復的可注射復合殼聚糖水凝膠，主要由改性殼聚糖、內載細胞以及生物活性因子組成。

所述改性殼聚糖為聚N-異丙基丙烯酰胺接枝改性的殼聚糖。

所述內載細胞為表皮干細胞、胚胎干細胞、間充質干細胞、脂肪干細胞、表皮細胞、內皮細胞、角質細胞中的一種或幾種。

所述生物活性因子為抗菌活性因子、促細胞生長因子中的一種或幾種，其中所述抗菌活性因子為醋酸氯己定CHX、銀納米顆粒、抗菌肽中的一種或幾種，其中促細胞生長因子為VEGF、EGF、聚多巴胺、膠原蛋白、RGD、絲膠蛋白、絲素蛋白以及其他氨基酸或多肽中的一種或幾種。

本發明所述的一種用于皮膚創傷修復的可注射復合殼聚糖水凝膠的制備方法是：

1)聚N-異丙基丙烯酰胺接枝改性的殼聚糖生物大分子的制備：按照質量計，將1-20份殼聚糖、0.1-4份酸、0.01-10份引發劑、1-20份N-異丙基丙烯酰胺、50-98份溶劑加入燒杯中，攪拌溶解均勻后，加熱至40-80℃反應1-12小時，隨后將溶液轉移入透析袋中，用去離子水反復透析，冷凍干燥得到聚N-異丙基丙烯酰胺接枝改性的殼聚糖粉末；

2)聚N-異丙基丙烯酰胺接枝改性的殼聚糖水溶液的制備：將1-20份1)中的聚N-異丙基丙烯酰胺接枝改性的殼聚糖粉末加入80-99份PBS溶液中，低溫環境下攪拌溶解均勻后得到水凝膠前體溶液。