[發明專利]一種基于MALDI-TOF/TOF表征甘油三酯進行大豆和大豆油的產地溯源方法

有效

• 申請號: 202110346204.0
• 申請日: 2021-03-31
• 公開（公告）號: CN113419014B
• 公開（公告）日: 2023-08-01
• 發明（設計）人: 陳文銳;王志元;曾廣豐;謝建軍;丁博;侯穎燁;李菊;王璐
• 申請（專利權）人: 廣州海關技術中心
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/72
• 代理公司: 廣州圣理華知識產權代理有限公司 44302
• 代理人: 董覺非;張凱

1.一種基于MALDI-TOF/TOF表征甘油三酯進行大豆和大豆油的產地溯源方法，其特征在于，包括如下步驟：

S1.標準樣品制備：將具有明確地區的不同產地的大豆樣品分別經過壓榨得到不同產地的標準樣品，使用棉簽蘸取標準樣品印在含有基質的靶板上，所述大豆樣品來源于至少兩個不同產地；

S2.標準樣品的質譜數據采集：用基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜儀分別采集不同產地的所述標準樣品的質譜數據信息，獲得所述標準樣品的高分辨質譜數據；

S3.靶向化合物的確定：將步驟S2獲得的高分辨質譜數據中的甘油三酯化合物質譜數據與脂類化合物數據庫中的標準甘油三酯化合物數據進行匹配，確定所述標準樣品的甘油三酯靶向化合物；

S4.大豆和大豆油產地溯源鑒定模型建立：確定甘油三酯靶向化合物后，將甘油三酯靶向化合物對應的甘油三酯化合物高分辨質譜數據通過分析軟件進行歸一化和平均處理之后，將處理后的數據進行主成分分析法、偏最小二乘法-判別分析法和正交偏最小二乘法回歸分析法中的一種或多種方式處理，以獲得標準樣品中不同產地大豆油脂特征分布規律，構建基于脂質組學的大豆和大豆油產地溯源鑒定模型；

S5.結果預測：將待檢測的大豆樣品經過壓榨得到待檢測大豆油樣品，使用棉簽蘸取待檢測大豆油樣品印在含有基質的靶板上，通過基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜儀采集待檢測大豆油樣品的甘油三酯化合物高分辨質譜數據，導入所述大豆和大豆油產地溯源鑒定模型中，進行待檢測大豆的產地溯源預測；

所述步驟S4還包括盲樣驗證步驟，所述盲樣驗證步驟包括：選取同一地區的多個大豆驗證樣品，將具有明確地區的大豆驗證樣品通過基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜儀采集的甘油三酯化合物高分辨質譜數據導入步驟S4中的所述大豆和大豆油產地溯源鑒定模型中，驗證所述大豆驗證樣品的產地溯源準確度；

所述步驟S3的確定靶向化合物的方法包括：根據所述高分辨質譜數據中的目標物分子量范圍，將大豆油樣品中的高分辨質譜數據分為2個區域：分子量在800-1000的第一區域，分子量在700-800的第二區域，所述第一區域與第二區域是大豆油油脂代謝特征區域，將脂類化合物數據庫中的分子量范圍在700-950之間的動植物來源甘油三酯化合物與第一區域和第二區域中的大豆油甘油三酯化合物進行匹配篩選，確定分子量范圍在850-930Da之間的64個大豆油中的甘油三酯化合物為甘油三酯靶向化合物；

所述步驟S1中，每6個標準樣品使用聚乙二醇校準一次，每個標準樣品平行測定三次；

所述步驟S4中還包括對大豆和大豆油產地溯源鑒定模型的優化步驟，所述優化步驟包括：通過大豆和大豆油產地溯源鑒定模型的VIP值確定所述甘油三酯靶向化合物中貢獻值度大的部分甘油三酯化合物，選取38個甘油三酯化合物作為優選后的甘油三酯靶向化合物，包括分子量如下的甘油三酯化合物：853.7、854.7、875.7、876.7、877.7、878.7、879.7、880.7、881.7、882.8、883.7、893.7、894.7、895.7、896.7、897.7、898.7、899.7、900.7、901.7、902.7、903.7、904.7、905.7、906.7、907.7、909.7、915.7、916.7、917.7、918.7、919.7、920.7、921.7、922.7、923.7、908.7；

所述步驟S4中，將所述標準樣品中的甘油三酯化合物高分辨質譜數據依次進行歸一化和平均處理、正交偏最小二乘法回歸分析法處理，構建基于脂質組學的OPLS-DA大豆和大豆油產地溯源鑒定模型。

2.根據權利要求1所述的大豆和大豆油的產地溯源方法，其特征在于，所述基質為2，5-二羥基苯甲酸、芥子酸和2-氰基-4-羥基肉桂酸中的一種或多種。

3.根據權利要求1所述的大豆和大豆油的產地溯源方法，其特征在于，所述基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜儀在Flex?Control軟件上采集所述標準樣品的高分辨質譜數據，所述甘油三酯化合物高分辨質譜數據在Flex?Analysis軟件上定性定量進行歸一化和平均處理分析。