[發(fā)明專利]一種人參屬中藥中多糖的分子量與分子量分布的測定方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110337544.7 | 申請日: | 2021-03-30 |
| 公開(公告)號: | CN113189213A | 公開(公告)日: | 2021-07-30 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 楊文志;高秀梅;胡瑩;李雪;劉杰 | 申請(專利權(quán))人: | 天津中醫(yī)藥大學(xué) |
| 主分類號: | G01N30/02 | 分類號: | G01N30/02;G01N30/74;G01N30/86 |
| 代理公司: | 北京柏杉松知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11413 | 代理人: | 劉繼富;王春偉 |
| 地址: | 301617 天津市*** | 國省代碼: | 天津;12 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 人參 中藥 多糖 分子量 分布 測定 方法 | ||
1.一種人參屬中藥中多糖的分子量與分子量分布的測定方法,所述方法包括:
(1)超聲提取人參屬中藥中的多糖,制備1-10mg/mL的多糖水溶液;
(2)采用高效分子排阻色譜-多角度激光光散射檢測器-示差折光檢測器聯(lián)用的方法檢測所述多糖水溶液,得到多糖的多角度激光光散射色譜圖和示差折光色譜圖;
其中,色譜條件包括:
色譜柱:以親水性球型高聚物為填充劑的色譜柱;
色譜柱分子排阻限:8×105-8×106;
流動相:100-200mmol/L的甲酸銨溶液;
柱溫:25-35℃;流速:0.5-0.7mL/min;進樣體積:20-50μL;等度洗脫;
多角度激光光散射檢測器的檢測條件包括:
檢測波長:650-670nm;激光角度范圍:6-10個,15°-170°;折光指數(shù)增量:0.1380mL/g;
示差折光檢測器的檢測條件包括:
檢測器溫度:35-45℃;
(3)根據(jù)所述多糖的多角度激光光散射色譜圖和示差折光色譜圖,獲得人參屬中藥中多糖的分子量與分子量分布。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測定方法,其中,所述人參屬中藥選自人參、西洋參、三七、紅參、竹節(jié)參、珠子參中的至少一種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測定方法,其中,所述色譜條件包括:色譜柱分子排阻限:9×105-2×106。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測定方法,其中,所述色譜柱選自Shodex OHpak SB-805HQ、Shodex OHpak SB-804HQ、TSK G4000 PWXL或UltrahydrogelTM2000。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測定方法,其中,步驟(1)所述超聲提取人參屬中藥中的多糖,包括:取質(zhì)量為M的人參屬中藥粉末,溶于體積為V1的水中,超聲提取后經(jīng)純化、透析、凍干,獲得所述多糖;其中,M/V1為(50-200):1mg/mL。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的測定方法,其中,超聲提取的時間為0.5-1.5h,提取功率為30-50kHz,提取溫度為60-80℃。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的測定方法,其中,采用Sevage法對超聲提取后的多糖進行純化。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的測定方法,其中,采用截留分子量為3000-4000Da的透析袋進行透析,透析的時間為40-60h。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測定方法,其中,步驟(3)所述多糖的多角度激光光散射色譜圖和示差折光色譜圖,以色譜峰時間為9.0-11.0、11.0-13.5、13.5-16.0、16.0-18.8min進行分段,獲得人參屬中藥中多糖的分子量與分子量分布。
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