[發明專利]一種用于特異性檢測氯霉素的電化學發光適配體傳感器及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202110325765.2
• 申請日: 2021-03-26
• 公開（公告）號: CN113075269B
• 公開（公告）日: 2023-01-17
• 發明（設計）人: 陳智棟;溫靜;單學凌;蔣鼎;王文昌
• 申請（專利權）人: 常州大學
• 主分類號: G01N27/30
• 分類號: G01N27/30;G01N27/48
• 代理公司: 常州市英諾創信專利代理事務所(普通合伙) 32258
• 代理人: 王志慧

本發明提供了一種用于特異性檢測氯霉素的電化學發光適配體傳感器及其制備方法和應用，具體屬于電化學發光檢測領域。包括：(1)黑磷摻雜的PTC?NH₂的復合材料(BP/PTC?NH₂)以及Co?Ni/MOF的制備；(2)電化學發光適配體傳感器的制備；(3)將BP/PTC?NH₂與Co?Ni/MOF共同修飾到玻碳電極表面，提高電化學發光的靈敏度和穩定性，隨后負載適配體即可獲得電化學發光適配體傳感器，該傳感器可特異性識別氯霉素,檢測范圍為1.0×10^?13mol/L～1.0×10^?6mol/L，最低檢測限為2.9×10^?14mol/L。本發明檢測氯霉素的靈敏度高、特異性強、操作簡單。

技術領域

本發明屬于電化學發光檢測領域，涉及一種用于特異性檢測氯霉素的電化學發光適配體傳感器及其檢測方法。尤其涉及將適配體分子負載于 Co-Ni/MOF/BP/PTC-NH₂修飾的玻碳電極表面，即以 apt/Co-Ni/MOF/BP/PTC-NH₂/GCE電極為傳感元件，定量檢測河水中氯霉素的電化學發光分析方法。

背景技術

氯霉素(Chloramphenicol，CAP)，是首個可以完全經化學合成方法大量生產的廣譜抗生素，具有藥性穩定、價格低廉等優點，并對革蘭氏陰性菌引起的感染性疾病有很好的治療效果。基于此，氯霉素被廣泛應用于人和動物細菌性疾病的治療以及畜牧、水產飼料添加劑中。但CAP不僅具有嚴重的毒副作用，而且高溫下穩定，不易分解，半衰期較長，一旦通過食物鏈傳遞給人類，將會抑制骨髓造血導致血小板減少，誘使細胞癌變，引起中樞或外圍神經系統疾病。因此，自 1994年起，世界上多個國家和地區規定不得在食品中檢測出CAP。中國農業部也于2000年將氯霉素從《中國獸藥典》中刪除。

目前，已有報道的檢測氯霉素的方法包括微生物法，氣相色譜-質譜法(GC-MS)，酶聯免疫吸附測定法(ELISA)，高效液相色譜-質譜法(HPLC-MS)，光電化學分析法(PEC)及電化學法等。但大多數分析法的儀器操作專業度高，前處理過程復雜，耗時長，尤其是微生物法的結果容易出現假陽性、色譜法的檢測費用昂貴，因此它們難以推廣到市場中進行現場檢測。基于此，開發一種簡單快速、選擇性好的檢測氯霉素的方法是必要且極其重要的。

核酸適配體作為一種新型識別元件，合成簡單快速、成本低、選擇性好、性質穩定且易于修飾標記，是一種優良的抗體替代識別元件。電化學發光(ECL)也稱為電致化學發光，是化學發光與電化學的結合和延伸，因而它具有化學發光方法優點如靈敏度高、線性范圍寬、觀察方便和儀器簡單；同時具有許多化學發光方法無法比擬的優點，如重現性好、試劑穩定、控制容易等優點。并且，無需引入外部光源，在光電倍增管等光學儀器的輔助下采集發光強度圖譜，并建立其與待測物關系從而實現微量分析的一種方法。目前在現有技術中，存在一些有關電化學發光適配體傳感器，其中CN201911323033.9一種電化學發光適配體傳感器及檢測氯霉素的方法，制備得到Ti₃C₂-ZnO納米復合材料修飾的電化學發光適配體傳感器，用于對氯霉素檢測,檢測范圍為0.1ng/mL～100ng/mL，最低檢測限為 0.019ng/mL，檢測范圍窄。因此如何制備得到一種電極材料，得到一種新型高選擇性高靈敏度的ECL傳感器，更有利于氯霉素的檢測，是本發明研究的重點。

發明內容

本發明的目的是提供一種檢測氯霉素的電化學發光適配體傳感器，具有靈敏度高、重現性好、選擇性好和線性范圍寬的優點。