[發明專利]一種檢測非洲豬瘟病毒IgA抗體的ELISA檢測方法及檢測試劑盒在審
| 申請號： | 202110317194.8 | 申請日： | 2021-03-25 |
| 公開（公告）號： | CN113063941A | 公開（公告）日： | 2021-07-02 |
| 發明（設計）人： | 王云峰;王牟平;董明奇 | 申請（專利權）人： | 哈爾濱國生生物科技股份有限公司 |
| 主分類號： | G01N33/569 | 分類號： | G01N33/569;G01N33/68;G01N33/58 |
| 代理公司： | 北京象合知識產權代理事務所(普通合伙) 11893 | 代理人： | 封明艷;鄭慧娟 |
| 地址： | 150068 黑龍江*** | 國省代碼： | 黑龍江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 檢測 非洲 豬瘟 病毒 iga 抗體 elisa 方法 試劑盒 | ||
1.一種非洲豬瘟病毒IgA抗體的ELISA檢測方法，該檢測方法以非洲豬瘟病毒采集豬的口腔拭子、鼻腔拭子、肛門拭子、陰道拭子或乳汁為檢測樣品，通過ELISA抗體檢測方法獲得檢測樣品中IgA的含量。
2.如權利要求1所述的非洲豬瘟病毒IgA抗體的ELISA檢測方法，該方法包括如下步驟:
(1)非洲豬瘟病毒重組蛋白的包被，
將純化后的非洲豬瘟病毒重組蛋白用包被液進行包被，，
(2)洗滌后封閉并進一步洗滌，
(3)加入待檢樣品，將稀釋后的非洲豬瘟病毒陽性樣品和陰性樣品加入封閉后的96孔板，
(4)加入抗豬IgA酶標抗體，孵育后進一步洗滌，
(5)加入底物溶液，孵育結束后加入終止液，在450nm的波長下讀數并記錄結果。
3.如權利要求2所述的非洲豬瘟病毒IgA抗體的ELISA檢測方法，所述包被液選擇碳酸鹽緩沖液、Tris-HCl緩沖液或磷酸鹽緩沖液。
4.如權利要求3所述的非洲豬瘟病毒IgA抗體的ELISA檢測方法，所述碳酸鹽緩沖液的pH值9.0-10.0、Tris-HCl緩沖液pH值8.2-8.6、磷酸鹽緩沖液pH值7.2-7.6。
5.如權利要求2所述的非洲豬瘟病毒IgA抗體的ELISA檢測方法，所述封閉液選擇含1-10％脫脂乳的PBST、含0.1-3％％BSA的PBST或含1-5％魚明膠的PBST。
6.如權利要求2所述的非洲豬瘟病毒IgA抗體的ELISA檢測方法，所述包被工作液濃度為0.1-20μg/ml。
7.一種非洲豬瘟的IgA抗體檢測試劑盒，所述試劑盒含有非洲豬瘟病毒重組蛋白、包被液、封閉液、抗豬IgA酶標抗體、底物溶液、終止液以及洗滌液，該試劑盒按照權利要求1-6任一項所述的非洲豬瘟病毒IgA抗體的ELISA檢測方法完成檢測。
8.一種非洲豬瘟病毒的聯合檢測試劑包，該試劑包包括非洲豬瘟病毒抗原檢測試劑盒和權利要求7所述的非洲豬瘟的IgA抗體檢測試劑盒。
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