[發明專利]生物體內液各組分調控蛋白納米顆粒跨膜滲透壓的量化分析技術

有效

• 申請號: 202110303366.6
• 申請日: 2021-03-22
• 公開（公告）號: CN113237807B
• 公開（公告）日: 2023-01-06
• 發明（設計）人: 郭軍;吳輝文;王圓圓;鄭子慧;陳佳慧;仇慧敏
• 申請（專利權）人: 南京中醫藥大學
• 主分類號: G01N15/08
• 分類號: G01N15/08;G01N13/04
• 代理公司: 南京鐘山專利代理有限公司 32252
• 代理人: 蔣廈

1.一種生物體內液各組分調控蛋白納米顆粒跨膜滲透壓的量化分析技術，其特征在于：檢測生物體內液蛋白質的總量以及生物體內液中各種離子及小分子化合物的含量；依據各種離子和小分子化合物的含量以及蛋白納米顆粒的數量，采用以熒光共振能量轉移為原理的中間纖維熒光張力檢測技術測定生物體內液跨膜滲透勢能的數值變化，其方法包括以下步驟：

步驟一：獲取生物體內液樣本，以建立中間纖維熒光張力檢測技術測定生物體細胞內外滲透勢能差值變化的方法；

步驟二：利用具有足夠分辨率的成像光對生物體內液樣本進行光強度檢測，確定其中蛋白質納米顆粒數量；采用全自動生化光學檢測儀，檢測溶液中蛋白質、各種離子和小分子化合物含量；

步驟三：依據熒光共振能量轉移原理，建立中間纖維熒光張力檢測探針技術，采用熒光共振能量轉移效率的倒數1 /E，評價細胞容積的變化，分析生物體內液的生物跨膜滲透勢能變化；

步驟四：繪制蛋白納米顆粒和至少一種離子或小分子化合物的組成，其濃度改變誘導細胞跨膜勢能變化的多維曲線關系；

步驟五：依據上述建立的多維曲線關系，通過檢測人體內液的蛋白納米顆粒、離子和小分子化合物的組成變化，推測生物體內液的跨膜滲透勢能變化；

其中，生物體內液是指含蛋白納米顆粒的血漿、細胞間隙液、細胞質或細胞核提取液而并非代指所有的體內液；

蛋白質總量是指由生物體內液中蛋白納米顆粒、蛋白顆粒聚合體的大小和數量計算得到的總和也并非所有蛋白質的總量；

中間纖維熒光張力檢測技術是應用細胞熒光張力檢測技術評價細胞內外滲透勢能變化誘導中間纖維牽拉張力變化，并繪制跨膜滲透壓改變與細胞中間纖維牽拉誘導的熒光共振能量轉移效率的標準曲線關系，建立細胞跨膜滲透勢能變化的光學評價曲線，評價細胞內中間纖維牽拉張力的光學變化與跨膜滲透勢能改變的量化曲線關系。

2.根據權利要求1所述的生物體內液各組分調控蛋白納米顆粒跨膜滲透壓的量化分析技術，其特征在于：所述的生物體內液的跨膜滲透勢能是指生物體內液中的細胞內外滲透壓差，是細胞受到細胞外滲透壓刺激后的細胞滲透勢能動態變化過程。

3.根據權利要求1所述的生物體內液各組分調控蛋白納米顆粒跨膜滲透壓的量化分析技術，其特征在于：所述的多維曲線關系包括單因素變化對應關系、雙因素變化對應關系、多因素變化對應關系。

4.根據權利要求1所述的生物體內液各組分調控蛋白納米顆粒跨膜滲透壓的量化分析技術，其特征在于：所述的多維曲線關系為二維曲線關系。