[發明專利]一種利用磁珠探針快速檢測環介導等溫擴增核酸產物的方法

在審

• 申請號: 202110302845.6
• 申請日: 2021-03-22
• 公開（公告）號: CN112795630A
• 公開（公告）日: 2021-05-14
• 發明（設計）人: 梁重陽;徐抒平;孫非;關鑫;徐冰
• 申請（專利權）人: 吉林大學
• 主分類號: C12Q1/6844
• 分類號: C12Q1/6844
• 代理公司: 吉林省中玖專利代理有限公司 22219
• 代理人: 姜姍姍

1.一種利用磁珠探針快速檢測環介導等溫擴增核酸產物的方法，其特征在于，包括如下步驟：

S1、設計待檢測樣本環介導等溫擴增引物和制備與待檢測樣本特異性結合的磁珠探針；

S2、將所述的環介導等溫擴增引物與緩沖液與DNA聚合酶預混，加入待檢測樣本，加溫進行反應后得到環介導等溫擴增產物；

S3、將所述的磁珠探針加入到所述的環介導等溫擴增產物，孵育；

S4、等溫擴增液洗滌磁珠，再加入雙鏈DNA染料，孵育；

S5、觀察如果有熒光，判斷所述的待測樣本是否含有目標核酸序列。病毒則結果判斷為陽性，如果沒有熒光，則結果判斷為陰性。

2.如權利要求1所述的一種利用磁珠探針快速檢測環介導等溫擴增核酸產物的方法，其特征在于：所述磁珠探針是將根據環介導等溫擴增產物的單鏈環狀結構設計互補的單鏈探針修飾于磁珠表面得到。

3.如權利要求1所述的一種利用磁珠探針快速檢測環介導等溫擴增核酸產物的方法，其特征在于：所述單鏈探針是生物素鏈霉親和素系統修飾于磁珠表面。

4.如權利要求1所述的一種利用磁珠探針快速檢測環介導等溫擴增核酸產物的方法，其特征在于：所述磁珠探針中的磁珠為但不限于具有超順磁性的磁珠。

5.如權利要求1所述的一種利用磁珠探針快速檢測環介導等溫擴增核酸產物的方法，其特征在于：所述的待測樣本為來自病原體的基因樣本。

6.如權利要求5所述的一種利用磁珠探針快速檢測環介導等溫擴增核酸產物的方法，其特征在于：所述的病原體的基因樣本為病原體DNA樣本或是來自于病原體的RNA逆轉錄樣本。

7.如權利要求1所述的一種利用磁珠探針快速檢測環介導等溫擴增核酸產物的方法，其特征在于：步驟S5中的所述的檢測信號為紫外燈下得到的熒光信號。

8.如權利要求1所述的一種利用磁珠探針快速檢測環介導等溫擴增核酸產物的方法，其特征在于：步驟5還包括設置陰性對照組，所述的陰性對照組為無目標核酸序列的待測樣本，有熒光或較強，則結果判斷為陽性，沒有熒光，則結果判斷為陰性。

9.權利要求1至9中的任意所述的利用磁珠探針快速檢測環介導等溫擴增核酸產物的方法在檢測目標核酸序列中的應用。