[發(fā)明專(zhuān)利]一種超靈敏SERS免疫傳感器的制備方法及其在宮頸癌血清生物標(biāo)志物檢測(cè)的應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110285129.1
• 申請(qǐng)日: 2021-03-17
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113049823A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-06-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 盧丹;曹小衛(wèi);冉夢(mèng)林;劉依帆;史宏?duì)N
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 揚(yáng)州大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/574
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/574;G01N21/65
• 代理公司: 揚(yáng)州蘇中專(zhuān)利事務(wù)所(普通合伙) 32222
• 代理人: 沈志海

1.一種超靈敏SERS免疫傳感器的制備方法，其特征是，在制備Au@SiO₂陣列基底的過(guò)程中，使用Langmuir-Blodgett方法獲得單層SiO₂微球陣列，然后用油水界面自組裝法在SiO₂微球表面覆蓋單層AuNPs；通過(guò)有限差分時(shí)域模擬基底的增強(qiáng)電磁場(chǎng)；SiO₂微球表面上的電磁場(chǎng)以及相鄰微球之間的間隙均得到增強(qiáng)，證明Au@SiO₂陣列基底具有高密度“熱點(diǎn)”；

4-氨基苯硫酚(4-ATP)和5,5'-二硫代雙-(2-硝基苯甲酸)(DTNB)的拉曼峰很容易區(qū)分，選擇它們來(lái)制備兩個(gè)探針，它們不僅可以通過(guò)-SH鍵抓住Au-AgNS，而且還可以通過(guò)形成酰胺鍵與抗體結(jié)合；將抗survivin抗體和抗OPN抗體與Au@SiO₂陣列基底和Au-AgNSs連接后，制成了由免疫基底和免疫探針組成的SERS免疫傳感器。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種超靈敏SERS免疫傳感器的制備方法，其特征是，包括：

1)血液樣本的采集和處理；

2)免疫基底的制備；

2.1)AuNPs的合成；

2.2)SiO₂微球的合成；

2.3)親水硅片的制備；

2.4)單層SiO₂微球陣列的制備；

2.5)Au@SiO₂陣列基底的制備；

2.6)抗survivin抗體和抗OPN抗體偶聯(lián)的Au@SiO₂陣列基底的制備；

3)Au-AgNS的合成；

4)Au-AgNSs免疫探針的制備。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種超靈敏SERS免疫傳感器的制備方法，其特征是，步驟1)血液樣本的采集和處理：血清樣本分為健康人群、CIN 1、CIN 2、CIN 3和宮頸癌患者五組，在早餐前抽取5mL靜脈血，在4℃下3000r/min轉(zhuǎn)速離心處理10min之后，將獲得的血清樣本保存在-80℃下。