[發明專利]一種生殖道分泌物多重熒光染色液及其制備方法和應用

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• 申請號: 202110273305.X
• 申請日: 2021-03-12
• 公開（公告）號: CN113049557A
• 公開（公告）日: 2021-06-29
• 發明（設計）人: 申令;李小梅;段天雄;丘春尚
• 申請（專利權）人: 廣州江元醫療科技有限公司
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 北京精金石知識產權代理有限公司 11470
• 代理人: 王洋

1.一種生殖道分泌物多重熒光染色液，其特征在于，所述的生殖道分泌物多重熒光染色液包括熒光素、核酸染料、抑菌劑、防淬滅劑、通透劑和緩沖液；pH4.5-6.0。

2.根據權利要求1所述的生殖道分泌物多重熒光染色液，其特征在于，所述的熒光素為吖啶橙、異硫氰酸熒光素、四乙基羅丹明、四甲基異硫氰酸羅丹明、5-羧基-4,7-二氯羅丹明6G、6-羧基-4,7-二氯羅丹明6G、5-羧基-4,7-二氯四甲基羅丹明、6-羧基-4,7-二氯四甲基羅丹明、5-羧基-4,7-二氯-X-羅丹明、AMCA琥珀酰亞胺酯、AMCA C2馬來酰亞胺、7-二乙胺基-2-氧代-2-苯并吡喃-3-羧酸、AMCA乙二胺、EDANS酸5-(2-氨基乙氨基)-1-萘磺酸、EDANS鈉鹽5-(2-氨基乙氨基)-1-萘磺酸鈉鹽、EDANS C2馬來酰亞胺、生物素酰肼或生物胞素酰肼中的一種或幾種的組合。

3.根據權利要求1所述的生殖道分泌物多重熒光染色液，其特征在于，所述的核酸染料為6-羧基熒光素、5(6)-羧基熒光素琥珀酰亞胺酯、氨基烯丙基-DUTP鈉鹽、DAPI、碘化丙啶、溴化乙啶或溴化乙啶衍生物中的一種或幾種的組合。

4.根據權利要求1所述的生殖道分泌物多重熒光染色液，其特征在于，所述的抑菌劑為Proclin 300、疊氮鈉、硫柳汞、山梨酸鉀、異噻唑啉酮、慶大霉素、甲醛或多聚甲醛中的一種或幾種的組合。

5.根據權利要求1所述的生殖道分泌物多重熒光染色液，其特征在于，所述的防淬滅劑為甘油、P-苯二胺、n-丙基沒食子酸鹽、1，4-二偶氮雙環-辛烷、4-二甲胺偶氮苯-4’-羧酸、4-[4-(二甲基氨基)苯偶氮]苯甲酸N-丁二酰亞胺酯、DABCYL C2胺、DABCYL C2馬來酰亞胺或抗壞血酸中的一種或幾種的組合。

6.根據權利要求1所述的生殖道分泌物多重熒光染色液，其特征在于，所述的通透劑為Triton X-100或吐溫。

7.根據權利要求1所述的生殖道分泌物多重熒光染色液，其特征在于，所述的緩沖液為乙酸-乙酸鉀緩沖液、硼酸鹽緩沖液、醋酸鹽緩沖液、碳酸鹽緩沖液、Tris-Hcl緩沖液中的一種或幾種的組合。

8.根據權利要求7所述的生殖道分泌物多重熒光染色液，其特征在于，所述的生殖道分泌物多重熒光染色液包括吖啶橙0.01-100mg/L，碘化丙啶0.01-100mg/L，多聚甲醛0.01-5g/L，甘油10-100mL/L，P-苯二胺0.1-1g/L，Triton X-100 1-10mL/L，乙酸鉀1-30g/L，乙酸1-10mL/L，純化水補足至1L；pH4.5-6.0。

9.權利要求8所述的生殖道分泌物多重熒光染色液的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1.將乙酸鉀溶于純化水中，攪拌至完全溶解；

S2.添加乙酸，調節pH值為4.5-6.0；

S3.將熒光素、核酸染料溶解于S2所得的溶液中，攪拌均勻至完全溶解；

S4.依次將抑菌劑、防淬滅劑及通透劑添加至S3所得溶液中，攪拌均勻；

S5.調節S4所得溶液pH值為4.5-6.0，即得生殖道分泌物多重熒光染色液。

10.權利要求1-8任一項所述的生殖道分泌物多重熒光染色液在檢測陰道分泌物樣本、宮頸脫落細胞樣本中的應用。