[發(fā)明專(zhuān)利]心肌纖維化疾病輔助診斷相關(guān)的miRNA標(biāo)志物及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110268102.1
• 申請(qǐng)日: 2021-03-11
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112813158B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-12-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 胡喜田;王碩;楊艷;王恩茂
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 石家莊市人民醫(yī)院
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/6883
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/6883;C12N15/113;A61K45/00;A61P9/00
• 代理公司: 北京預(yù)立生科知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11736
• 代理人: 孟祥斌

本發(fā)明公開(kāi)了心肌纖維化疾病輔助診斷相關(guān)的miRNA標(biāo)志物及其應(yīng)用，通過(guò)高通量測(cè)序分析技術(shù)，篩選出在患有心肌纖維化疾病的患者中差異表達(dá)的hsa?miR?6802?3p、hsa?miR?1229?3p，進(jìn)一步的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了miRNA生物標(biāo)志物hsa?miR?6802?3p、hsa?miR?1229?3p能夠用于臨床上心肌纖維化的輔助診斷中，對(duì)早期診斷心肌纖維化具有重要意義，同時(shí)，也為臨床上制備針對(duì)心肌纖維化的藥物提供了藥物靶點(diǎn)，有助于實(shí)現(xiàn)心肌纖維化的靶向治療。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，涉及心肌纖維化疾病輔助診斷相關(guān)的miRNA標(biāo)志物及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

心血管疾病是全球頭號(hào)致命的疾病，據(jù)國(guó)家心血管病中心發(fā)布的《中國(guó)心血管健康與疾病報(bào)告2019》顯示，心血管疾病死亡是中國(guó)人排名第一位的死亡原因，該疾病的種類(lèi)繁多，病因復(fù)雜。其中，由中、重度的冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性狹窄所引起心肌纖維持續(xù)性和/或反復(fù)加重的缺血缺氧將導(dǎo)致心肌纖維化(Myocardial fibrosis，MF)疾病，其特征是心肌成纖維細(xì)胞過(guò)度增殖，心肌成纖維細(xì)胞活化為肌成纖維細(xì)胞，并分泌Ⅰ型膠原蛋白，導(dǎo)致Ⅰ型膠原蛋白過(guò)度沉積。已有相關(guān)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究確定早期心肌纖維化可以被血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑所預(yù)防和逆轉(zhuǎn)，因此，及時(shí)有效的對(duì)受試者是否患有心肌纖維化疾病做出診斷至關(guān)重要。理想的生物標(biāo)志物具備檢測(cè)方法簡(jiǎn)易、提供更多臨床信息、指導(dǎo)臨床診療等特征。通過(guò)對(duì)受試者血液中某些生物標(biāo)志物的檢測(cè)，可望實(shí)現(xiàn)對(duì)心肌纖維化的早期發(fā)現(xiàn)、早期干預(yù)。

隨著現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展，現(xiàn)已有越來(lái)越多的研究發(fā)現(xiàn)特異性的基因能夠成為診斷和治療心肌纖維化疾病的生物標(biāo)志物，如中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)201410196658.4(申請(qǐng)?zhí)?提供了一種miRNA在治療或診斷心肌纖維化疾病中的應(yīng)用，中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)200910170215.7(申請(qǐng)?zhí)?提供了一種microRNA-328及其反義核苷酸在診斷和治療心臟疾病(如房顫、長(zhǎng)QT綜合征、缺血再灌注、心肌纖維化等)中的應(yīng)用，中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)201210513097.7(申請(qǐng)?zhí)?提供了一種miRNA-874及其反義核苷酸在診斷和治療重大心臟疾病(如心肌肥大、心肌纖維化等)中的應(yīng)用，中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)201910391352.7(申請(qǐng)?zhí)?提供了一種miRNA-361及其反義核苷酸在診斷和治療心臟疾病(如心肌梗死、心肌缺血損傷、心肌肥厚、心肌纖維化等)中的應(yīng)用，目前，仍缺乏心肌纖維化疾病相關(guān)的有效的生物標(biāo)志物，以及時(shí)有效的對(duì)受試者是否患有心肌纖維化疾病做出診斷。

鑒于此，本發(fā)明通過(guò)高通量測(cè)序分析技術(shù)，篩選出在患有心肌纖維化疾病的患者中差異表達(dá)的miRNA，本發(fā)明涉及的miRNA生物標(biāo)志物包括hsa-miR-6802-3p、hsa-miR-1229-3p，目前，hsa-miR-6802-3p、hsa-miR-1229-3p和心肌纖維化疾病之間的相關(guān)性均未見(jiàn)報(bào)道。進(jìn)一步的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了miRNA生物標(biāo)志物hsa-miR-6802-3p、hsa-miR-1229-3p能夠用于臨床上心肌纖維化的輔助診斷中，對(duì)早期診斷心肌纖維化具有重要的意義，同時(shí)，也為臨床上制備針對(duì)心肌纖維化的藥物提供了藥物靶點(diǎn)，有助于實(shí)現(xiàn)心肌纖維化的靶向治療。

發(fā)明內(nèi)容

為了彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，本發(fā)明的目的在于提供心肌纖維化疾病輔助診斷相關(guān)的miRNA標(biāo)志物及其應(yīng)用。本發(fā)明通過(guò)高通量測(cè)序分析技術(shù)，篩選出在患有心肌纖維化疾病的患者中差異表達(dá)的miRNA，本發(fā)明涉及的miRNA生物標(biāo)志物包括hsa-miR-6802-3p、hsa-miR-1229-3p，進(jìn)一步的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了miRNA生物標(biāo)志物hsa-miR-6802-3p、hsa-miR-1229-3p能夠用于臨床上心肌纖維化的輔助診斷中，對(duì)早期診斷心肌纖維化具有重要的意義。

本發(fā)明的上述目的通過(guò)以下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)：

本發(fā)明的第一方面提供了檢測(cè)miRNA的試劑在制備診斷心肌纖維化的產(chǎn)品中的應(yīng)用。

進(jìn)一步，所述miRNA選自hsa-miR-6802-3p、hsa-miR-1229-3p中的至少一種；