[發(fā)明專利]生物活性組合物及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110264906.4
• 申請日: 2021-03-11
• 公開（公告）號(hào): CN113018244B
• 公開（公告）日: 2022-01-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張琦;邵文珺;徐明嘉;江源;董昕怡;肖燦;陸儉;崔鳳梅;曹建平
• 申請（專利權(quán)）人: 蘇州大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K8/99
• 分類號(hào): A61K8/99;A61K8/19;A61K8/81;A61K8/9728;A61K8/9789;A61K8/64;A61Q19/00;A61K35/51;A61K36/53;A61K47/32;A61K47/42;A61K47/04;A61P17/00;A61P17/16
• 代理公司: 北京中仟知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11825
• 代理人: 田江飛

1.一種生物活性組合物，其特征在于，包括干細(xì)胞分泌物和石墨烯-聚丙烯酸-RADA16-A納米顆粒，兩者的質(zhì)量比為(5-20)：(1-10)；

所述干細(xì)胞分泌物按照以下步驟制備而成：先將碘海醇與臍帶干細(xì)胞共培養(yǎng)，再加入藥物同時(shí)施加X射線輻照培養(yǎng)，然后棄去培養(yǎng)液并清洗后加入無血清培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，最后收集細(xì)胞培養(yǎng)液，富集后得到干細(xì)胞分泌物；

X射線的強(qiáng)度為0.5-2Gy；

所述藥物選自20-60μM白藜蘆醇、0.2-0.5μM地塞米松，0.2-2μM TN14003凍干粉，0.2-2μM T140凍干粉或0.2-1μM AMD3100凍干粉中的至少一種；

所述石墨烯-聚丙烯酸-RADA16-A納米顆粒按照以下步驟制備而成：

(a)將二異氰酸酯修飾到石墨烯表面；

(b)加入聚丙烯酸，使得聚丙烯酸的羧基與石墨烯表面的二異氰酸酯反應(yīng)，得到雙親性石墨烯-聚丙烯酸納米顆粒；

(c)用交聯(lián)活化劑活性雙親性石墨烯-聚丙烯酸納米顆粒，繼而使短肽RADA16-A與雙親性石墨烯-聚丙烯酸納米顆粒反應(yīng)，得到石墨烯-聚丙烯酸-RADA16-A納米顆粒；

其中，所述RADA16-A為精氨酸封端的RADA16。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物活性組合物，其特征在于，包括按質(zhì)量百分比計(jì)的如下組分：干細(xì)胞分泌物0.5-2％，石墨烯-聚丙烯酸-RADA16-A納米顆粒0.1-1％，酵母溶胞物0.1-0.4％，積雪草根提取物0.1-0.5％，迷迭香提取物0.05-0.15％，海藻糖0.1-0.4％，EDTA二鈉0.01-0.02％，水80-99％。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的生物活性組合物，其特征在于，還包括按質(zhì)量百分比計(jì)的如下組分：透明質(zhì)酸鈉0.5-2.5％，棕櫚酰四肽-70.1-0.6％，煙酰胺0.1-0.3％，泛醇0.02-0.07％，黃原膠0.02-0.06％，甘油3-5％和丁二醇2-6％。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物活性組合物，其特征在于，碘海醇的質(zhì)量濃度為2-100μg/mL。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的生物活性組合物，其特征在于，碘海醇的質(zhì)量濃度為10-20μg/mL。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物活性組合物，其特征在于，

碘海醇與臍帶干細(xì)胞共培養(yǎng)1-2天后再加入藥物。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物活性組合物，其特征在于，

X射線輻照后培養(yǎng)的時(shí)間為1-4天。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物活性組合物，其特征在于，

加入無血清培養(yǎng)基后培養(yǎng)的時(shí)間為1-4天。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物活性組合物，其特征在于，步驟(c)中，石墨烯-聚丙烯酸納米顆粒與短肽RADA16-A的質(zhì)量比為1：(0.5-1)。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物活性組合物，其特征在于，

所述石墨烯-聚丙烯酸納米顆粒的反應(yīng)濃度為10-15mg/mL。

11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物活性組合物，其特征在于，

所述聚丙烯酸的數(shù)均分子量為5000-10,000。

12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物活性組合物，其特征在于，

在步驟(c)中，先將短肽RADA6-A溶解于有機(jī)溶劑中，調(diào)節(jié)至pH至6.5-7.5，再與活化的雙親性石墨烯-聚丙烯酸納米顆粒反應(yīng)。

13.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物活性組合物，其特征在于，

所述交聯(lián)活化劑包括EDC和NHS。