[發(fā)明專利]一種一級優(yōu)質長重粒、廣譜抗稻瘟病?；旨嬗眯退净謴拖档姆肿佑N方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110256638.1
• 申請日: 2021-03-09
• 公開（公告）號: CN113016603B
• 公開（公告）日: 2022-03-11
• 發(fā)明（設計）人: 張月雄;秦鋼;黃大輝;韋敏益;劉馳;馬增鳳;羅同平;梁海福;李振經(jīng);秦媛媛
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學院
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02;A01H6/46;C12Q1/6895
• 代理公司: 北京科億知識產(chǎn)權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 李興林

1.一種一級優(yōu)質長重粒、廣譜抗稻瘟病常恢兼用型水稻恢復系的分子育種方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)以秈型優(yōu)質常規(guī)稻粵晶絲苗2號作母本，以秈稻恢復系蜀恢527作為父本進行雜交，獲得F1代種子；種植F1代，成熟后全部單株混收獲得F2代種子；

(2)種植F2代種子獲得遺傳分離大群體，分單株提取DNA，利用分子標記對恢復基因Rf3和Rf4進行檢測，以恢復系蜀恢527為對照，篩選雙基因均純合Rf3Rf3Rf4Rf4和基因型單純單雜Rf3rf3Rf4Rf4和Rf3Rf3Rf4rf4的單株，然后從這些單株中選擇穗瘟達到抗和高抗且農(nóng)藝性狀優(yōu)良的單株作為目標單株，分單株收獲種子形成F3株系；

(3)分株系種植F3代種子，利用分子標記對廣譜抗性基因Pi2和Pi5基因型進行檢測，選擇雙基因型均純合Pi2 Pi2 Pi5 Pi5和基因型單純單雜Pi2pi2Pi5 Pi5、Pi2 Pi2 Pi5 pi5且農(nóng)藝性狀優(yōu)良的單株做為備選單株，對照選育系譜，恢復基因Rf3和Rf4雙基因均純合Rf3Rf3Rf4Rf4的備選單株直接入選；基因型為單純單雜Rf3rf3Rf4Rf4和Rf3Rf3Rf4rf4的備選單株繼續(xù)進行分子標記檢測，篩選出雙基因均純合Rf3Rf3Rf4Rf4的單株，以上單株均分單株收獲種子，形成F4株系；

(4)分株系種植F4代種子，對照選育系譜，對廣譜抗性基因Pi2和Pi5雙基因型均純合Pi2 Pi2 Pi5 Pi5的株系直接選擇農(nóng)藝性狀優(yōu)良的單株；基因型為單純單雜Pi2pi2Pi5 Pi5和Pi2 Pi2 Pi5 pi5的株系繼續(xù)進行分子標記檢測，篩選雙基因型均純合Pi2 Pi2 Pi5 Pi5且農(nóng)藝性狀優(yōu)良的單株，以上單株均分單株收獲種子，形成F5株系；

(5)分株系種植F5代種子，選擇農(nóng)藝性狀優(yōu)良的單株與那豐A進行測交，收獲測交種以及對應測交單株形成F6株系；

(6)種植測交種以及對應測交單株形成F6代種子，選取雜種優(yōu)勢強、結實率和產(chǎn)量高以及小區(qū)植株整齊度好的對應單株，分單株收獲種子形成F7株系；

(7)利用稻瘟病菌株分別對每個F7代株系進行室內(nèi)苗期抗性鑒定和田間稻瘟病穗瘟抗性鑒定，根據(jù)抗性鑒定結果，選取抗譜廣且達到高抗的單株，分單株收獲種子，形成F8株系；

(8)分株系種植F8代種子，按株系混合提取每個株系的DNA，利用與Pib和pi55(t)緊密連鎖的分子標記進行檢測，篩選出攜帶有Pib和pi55(t)基因型純合的株系；

所述步驟(2)中使用的分子標記序列如SEQ ID NO.1至SEQ ID NO.4所示；

所述步驟(3)中Pi2和Pi5基因型進行檢測使用的分子標記序列如SEQ ID NO.5至SEQID NO.8所示；

所述步驟(4)中使用的分子標記序列如SEQ ID NO.5至SEQ ID NO.8所示；

所述步驟(8)中使用的分子標記序列如SEQ ID NO.9至SEQ ID NO.14所示。

2.根據(jù)權利要求1所述的分子育種方法，其特征在于，所述步驟(2)中F2代遺傳分離大群體種植株數(shù)在3000株以上。

3.根據(jù)權利要求1所述的分子育種方法，其特征在于，所述步驟(2)中農(nóng)藝形狀優(yōu)良是指千粒重≥32.0g，谷粒長≥10.5mm。

4.根據(jù)權利要求1所述的分子育種方法，其特征在于，所述步驟(7)中利用稻瘟病菌株進行抗性鑒定時使用的稻瘟菌孢子的濃度為2×10⁵個/mL。

5.根據(jù)權利要求1所述的分子育種方法，其特征在于，所述步驟(7)中室內(nèi)苗期抗性鑒定和田間稻瘟病穗瘟抗性鑒定是按照中國農(nóng)業(yè)部行業(yè)標準《水稻品種試驗稻瘟病抗性鑒定與評價技術規(guī)程》(NY/T2426-2014)進行抗性評價。