[發(fā)明專利]一種利用重組微生物全細(xì)胞催化合成L-苯乳酸的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110253638.6
• 申請(qǐng)日: 2021-03-02
• 公開（公告）號(hào): CN113025544A
• 公開（公告）日: 2021-06-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 饒志明;邵宇;張顯;徐美娟;楊套偉;邵明龍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江南大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/21
• 分類號(hào): C12N1/21;C12P7/42;C12R1/19
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211
• 代理人: 林娟

1.一種基因工程菌，其特征在于，表達(dá)了來源于普通變形桿菌Proteus vulgaris的L-氨基酸脫氨酶、來源于Lactobacillus sp.CGMCC 9967的苯丙酮酸還原酶和來源于枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis的葡萄糖脫氫酶。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基因工程菌，其特征在于，以細(xì)菌或真菌為宿主細(xì)胞。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的基因工程菌，其特征在于，以大腸桿菌為宿主細(xì)胞。

4.根據(jù)權(quán)利要求1～3任一所述的基因工程菌，其特征在于，所述L-氨基酸脫氨酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述苯丙酮酸還原酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述葡萄糖脫氫酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。

5.根據(jù)權(quán)利要求1～4任一所述的基因工程菌，其特征在于，以pET-28a為表達(dá)載體。

6.一種生產(chǎn)L-苯乳酸的方法，其特征在于，將權(quán)利要求1～5任一所述的基因工程菌添加至含有底物苯丙氨酸的反應(yīng)體系中進(jìn)行反應(yīng)，制備得到L-苯乳酸。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述反應(yīng)體系中還含有輔底物葡萄糖，所述底物苯丙氨酸與輔底物葡萄糖按照摩爾比為(1：1)～(5：1)的比例進(jìn)行添加。

8.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的方法，其特征在于，所述基因工程菌的菌體OD₆₀₀至少為10。

9.根據(jù)權(quán)利要求6～8任一所述的方法，其特征在于，所述苯丙氨酸在反應(yīng)體系中的終濃度至少為10g/L。

10.權(quán)利要求1～5任一所述的基因工程菌在制備含有L-苯乳酸的產(chǎn)品方面的應(yīng)用。