[發(fā)明專利]一種通過脫氮副球菌和希瓦氏菌共培養(yǎng)促進六價鉻去除的方法

有效

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• 申請日: 2021-03-01
• 公開（公告）號: CN113023902B
• 公開（公告）日: 2021-12-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳銀廣;徐亞楠
• 申請（專利權(quán)）人: 同濟大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;C02F101/22
• 代理公司: 上海光華專利事務(wù)所(普通合伙) 31219
• 代理人: 夏苗苗

本發(fā)明提供了一種通過脫氮副球菌和希瓦氏菌共培養(yǎng)促進六價鉻去除的方法。所述方法包括預(yù)先在有氧條件下用滅菌LB培養(yǎng)基分別培養(yǎng)脫氮副球菌和希瓦氏菌到OD₆₀₀為2～4；并配置反硝化培養(yǎng)基；向厭氧瓶中加入50～100mL的所述反硝化培養(yǎng)基，接著向所述厭氧瓶中加入待處理的六價鉻溶液、滅過菌的50μl10～100g/L的CaCl₂母液，再將預(yù)先培養(yǎng)好的脫氮副球菌接種到所述厭氧瓶中，確定初始接菌量為OD₆₀₀＝0.02～0.08；再接種希瓦氏菌，確定初始接菌量為OD₆₀₀＝0.04～0.20；氮氣吹掃5～10min去除氧氣；密封所述厭氧瓶，以還原所述待處理的六價鉻溶液得到鉻金屬。本方法具有操作條件操作簡單、綠色環(huán)保無二次污染、成本低廉、對重金屬離子的降解效率高等優(yōu)點。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物降解重金屬的技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種通過脫氮副球菌和希瓦氏菌共培養(yǎng)促進六價鉻去除的方法。

背景技術(shù)

鉻以多種價態(tài)形式存在，最常見的是三價和六價化合物，三價化合物是人體必需微量元素，六價鉻活性高，溶解度大，有毒，其毒性是三價鉻的100倍。六價鉻為吞入性毒物/吸入性毒物，皮膚接觸可能導(dǎo)致敏感，不僅易在體內(nèi)蓄積，更可能造成遺傳性基因缺陷，對環(huán)境有持久危險性。攝入超大劑量的鉻會導(dǎo)致腎臟和肝臟的損傷、惡心、胃腸道刺激、胃潰瘍、痙攣甚至死亡，長期接觸可引發(fā)癌癥，六價鉻是已知的肺癌發(fā)病率相關(guān)的人類致癌物。鉻作為重要的工業(yè)原料，它在工業(yè)廢水中廣泛存在，因此廢水六價鉻去除問題備受關(guān)注。針對化學法去除六價鉻存在成本高及二次污染嚴重、常見的微生物還原去除六價鉻方法效率低等問題。針對這些問題，提供一種安全環(huán)保，降解效率高的微生物促進微生物還原六價鉻的方法十分重要。

發(fā)明內(nèi)容

鑒于以上所述現(xiàn)有技術(shù)的缺點，本發(fā)明的目的在于提供一種通過脫氮副球菌和希瓦氏菌共培養(yǎng)促進六價鉻去除的方法，該方法利用向脫氮副球菌生物還原六價鉻的系統(tǒng)加入希瓦氏菌，并通過控制兩種微生物比例、碳氮比、溫度及pH，顯著提高六價鉻的微生物還原效率。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供一種通過脫氮副球菌和希瓦氏菌共培養(yǎng)促進六價鉻去除的方法，所述方法包括以下步驟：預(yù)先在有氧條件下用滅菌LB培養(yǎng)基分別培養(yǎng)脫氮副球菌和希瓦氏菌到OD600為2～4；并配置反硝化培養(yǎng)基：0.5～0.8g/L NH4Cl，0.1～0.8g/LMgSO4，2.0～3.2g/L KH2PO4，4.0～5.6g/L Na2HPO4，2.0～2.8g/L KNO3，7～13mg/L六價鉻離子溶液，微量元素1～3mL；加入4.0～6.0mL/L乳酸鈉，用NaOH和HCl調(diào)節(jié)體系的pH；110～150℃下滅菌15～30min；向厭氧瓶中加入50～100mL的所述反硝化培養(yǎng)基，接著向所述厭氧瓶中加入待處理的六價鉻溶液、滅過菌的50μl 10～100g/L的CaCl2母液，再將預(yù)先培養(yǎng)好的脫氮副球菌接種到所述厭氧瓶中，確定初始接菌量為OD600＝0.02～0.08；再接種希瓦氏菌，確定初始接菌量為OD600＝0.04～0.20；氮氣吹掃5～10min去除氧氣；密封所述厭氧瓶，以還原所述待處理的六價鉻溶液得到鉻金屬；其中，所述微量元素的構(gòu)成為：2.0～3.0g/LFeSO₄·7H₂O、6.5～7.6g/L Na₂-EDTA、0.2～0.4g/L Na2MoO₄·2H2O、0.01～0.03g/LMnCl₂·4H₂O、0.3～0.5g/L ZnCl₂、0.01～0.03g/L CaCl₂和0.1～0.4g/L CuCl₂·2H₂O。