[發明專利]一種同時鑒定黃連和黃柏成分的方法及其應用

有效

• 申請號: 202110209280.7
• 申請日: 2021-02-24
• 公開（公告）號: CN113759065B
• 公開（公告）日: 2023-04-07
• 發明（設計）人: 張志強;韓妮娜;韓紅梅;鄧海霞;梁勇滿;劉利娟;李納納;付靜
• 申請（專利權）人: 北京康仁堂藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/90
• 分類號: G01N30/90;G01N30/94;G01N30/95
• 代理公司: 北京三聚陽光知識產權代理有限公司 11250
• 代理人: 周衛賽

本發明屬于中藥檢測技術領域，具體提供了一種同時鑒定黃連和黃柏成分的方法，包括以下步驟，(1)供試品溶液、對照品溶液和對照藥材溶液的制備；(2)薄層色譜法檢測：包括兩次展開和分別檢視的步驟；其中，采用乙酸丁酯?甲醇?異丙醇?水為展開劑進行第一次展開，采用正丁醇?水?乙酸為展開劑進行第二次展開，首次利用“二次薄層展開法”分別采用特定組成的展開劑，采用同一薄層板無需第二次點樣，即可同時定性鑒別出黃連和黃柏成分，避免了單獨定性鑒別黃連、黃柏成分造成的資源和成本的提高，保證其質量的均一、穩定、可靠，具有準確率高、節約時間及成本、易于推廣應用的優點。

技術領域

本發明屬于中藥檢測技術領域，具體涉及一種同時鑒定黃連和黃柏成分的方法及其應用。

背景技術

隨著人民群眾健康保健意識的增強，對中成藥產品的質量和安全性有了更高的要求。當歸六黃湯是金元四大家之一的李東垣創制的一首名方，載于其所著的《蘭室秘藏》一書中。稱它為“治盜汗之圣藥”，主治陰虛火旺所致的盜汗。的當歸六黃湯組成為：當歸、生地黃、熟地黃、黃連、黃芩、黃柏、黃芪，共7味藥。

目前當歸六黃湯中有效成分如何鑒別還未見標準頒布，為了鑒別當歸六黃湯處方中的黃連，宿瑩在《當歸六黃湯物質基準的研究》中公開了薄層色譜法，采用表小檗堿和鹽酸黃連堿對照品，以正丁醇-醋酸-水(2：1：2)為展開劑展開后撿視。結果顯如圖1所示，供試品色譜中，在與表小檗堿和鹽酸黃連堿對照品色譜和黃連對照藥材色譜相應位置上，分別呈現相同顏色的熒光斑點，而陰性色譜在相同位置處無干擾，證明原料中投入了黃連。然而，該方法無法對處方中的黃柏進行鑒別，而黃柏又是當歸六黃湯重要的原料之一。

因此，亟需建立一種準確率高、節約時間及成本、易于推廣的方法來對當歸六黃湯復方制劑及物質基準實物的黃連、黃柏的定性鑒別進行控制，以保證其質量的均一、穩定、可靠。

發明內容

因此，本發明的目的在于解決現有技術所存在的問題，通過提供一種準確率高、節約時間及成本、易于推廣的方法同時對黃柏和黃連有效成分進行鑒別，從而保證產品質量可控、穩定。

為此，本發明公開了一種同時鑒定黃連和黃柏成分的方法，包括以下步驟，

(1)供試品溶液的制備、對照品溶液和對照藥材溶液；

(2)薄層色譜法檢測：包括兩次展開以及展開后分別檢視的步驟；采用乙酸丁酯-甲醇-異丙醇-水為展開劑進行第一次展開，采用正丁醇-水-乙酸為展開劑進行第二次展開。

優選的，薄層色譜法檢測包括如下步驟：

1)取供試品溶液在薄層板上點樣；

2)采用乙酸丁酯-甲醇-異丙醇-水為為展開劑進行第一次展開，取出，溶劑揮發，將薄層板置于360-370nm的光源下檢視；

3)采用正丁醇-水-乙酸為展開劑對步驟2)檢視后的薄層板進行第二次展開，取出，溶劑揮發，采用顯色劑顯色并在可見光下檢視。

作為優選的實施方式，溶劑揮發的方式可以直接晾干也可以用其他常規的輔助方式，例如烘干等。

作為優選的實施方式，步驟1)中，采用的薄層板為硅膠G薄層板。點樣體積為1-10μl，優選為1-5μl，更優選為1-3μl。

作為優選的實施方式，步驟2)中，乙酸丁酯-甲醇-異丙醇-水的體積比為3-4：3-4：1-2：0.6-1。

作為優選的實施方式，步驟2)中，在第一次展開之前還包括采用濃氨試液預飽和用于展開的容器，預飽和的時間為20-35min。

作為優選的實施方式，步驟3)中，正丁醇-水-乙酸的體積比為6-8：1-3：1-3。

作為優選的實施方式，步驟3)中，顯色劑選自碘化鉍鉀、磷鉬酸、稀碘化鉍鉀試液中的至少一種。