[發(fā)明專利]細(xì)胞外囊泡circRNAs作為胃癌診斷標(biāo)志物的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110206105.2
• 申請(qǐng)日: 2021-02-24
• 公開（公告）號(hào): CN112921090B
• 公開（公告）日: 2022-05-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張義;董召剛;肖珂;王洪春;王立水
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東大學(xué)齊魯醫(yī)院
• 主分類號(hào): C12Q1/6886
• 分類號(hào): C12Q1/6886
• 代理公司: 濟(jì)南圣達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37221
• 代理人: 孫維傲

本申請(qǐng)?zhí)峁┘?xì)胞外囊泡circRNAs作為胃癌診斷標(biāo)志物的應(yīng)用，所述circRNAs為Chr10q11、Chr1p11、Chr7q11中的至少一種。本發(fā)明通過高通量深度測(cè)序表達(dá)驗(yàn)證證明，細(xì)胞外囊泡circRNA Chr10q11、Chr1p11、Chr7q11可作為診斷胃癌的生物標(biāo)志物，并開發(fā)了相應(yīng)的檢測(cè)試劑盒，該試劑盒檢測(cè)靈敏度高、特異性高、檢測(cè)方便，滿足診斷胃癌病人的檢測(cè)需求，經(jīng)臨床驗(yàn)證診斷準(zhǔn)確率高，具有良好的實(shí)際應(yīng)用之價(jià)值。

技術(shù)領(lǐng)域

本申請(qǐng)涉及本發(fā)明屬于診斷標(biāo)志物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及細(xì)胞外囊泡circRNAs作為胃癌診斷標(biāo)志物的應(yīng)用。

背景技術(shù)

公開該背景技術(shù)部分的信息僅僅旨在增加對(duì)本申請(qǐng)的總體背景的理解，而不必然被視為承認(rèn)或以任何形式暗示該信息構(gòu)成已經(jīng)成為本領(lǐng)域一般技術(shù)人員所公知的現(xiàn)有技術(shù)。

胃癌是一種常見的消化道惡性腫瘤，是全球癌癥死亡的第三大原因。其發(fā)病率在全球惡性腫瘤中位居第五位，死亡率高居第三位，嚴(yán)重威脅著人類的健康。我國胃癌年發(fā)病率和死亡率分別為36.21/100,000和25.88/100,000，在惡性腫瘤中居第2位，僅次于肺癌。胃癌的致病因素多樣，發(fā)展過程復(fù)雜，晚期胃癌患者的5年生存率僅為5％-20％，中位總生存期為10個(gè)月。由于胃癌發(fā)病癥狀隱匿，且易發(fā)生淋巴結(jié)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，絕大多數(shù)胃癌患者在初次就診時(shí)就被確診為腫瘤晚期。因此，早期發(fā)現(xiàn)胃癌對(duì)提高生存率至關(guān)重要。目前，胃癌的發(fā)現(xiàn)手段主要包括胃鏡及活組織檢查、影像學(xué)檢查(鋇餐、CT等)、腫瘤標(biāo)志物等實(shí)驗(yàn)室檢查，其中病理活檢是診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，但其高昂的價(jià)格、有創(chuàng)性及不適性限制了其應(yīng)用。影像學(xué)檢查對(duì)腫瘤的解剖結(jié)構(gòu)顯示較好，但對(duì)于直徑較小的病灶通常不易顯示。外周血生物標(biāo)志物檢測(cè)是GC篩選的理想方法，傳統(tǒng)的腫瘤標(biāo)志物有癌胚抗體(CEA)、糖類抗體19-9(CA19-9)和糖類抗體72-4(CA72-4)。然而，傳統(tǒng)的腫瘤標(biāo)志物在胃癌診斷的敏感性和特異性上均存在不足，限制了其臨床應(yīng)用價(jià)值。因此，尋找具有較高敏感性和特異性的胃癌診斷標(biāo)志物是迫切需要的。

細(xì)胞外囊泡是在生理或病理?xiàng)l件下釋放的一組細(xì)胞來源的亞微米囊泡。根據(jù)細(xì)胞外囊泡的大小和生物發(fā)生機(jī)制，其被分類為外泌體(30-100nm)、微囊泡(MVS，100-1000nm)和凋亡小體(0.1-5μm),其表面標(biāo)志物為CD63、CD9、TSG101等，具有脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)。研究顯示細(xì)胞外囊泡參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展及功能調(diào)控，如增殖、遷移、血管生成、免疫調(diào)節(jié)等。細(xì)胞外囊泡可以被腫瘤細(xì)胞釋放入腫瘤微環(huán)境，進(jìn)而進(jìn)入外周循環(huán)，研究已經(jīng)證實(shí)，細(xì)胞外囊泡穩(wěn)定存在于外周血中，且在胃癌時(shí)表達(dá)升高，是具有良好應(yīng)用前景的腫瘤標(biāo)志物。細(xì)胞外囊泡幾乎在所有的體液中檢測(cè)到，包括血清/血漿、胃液、胸水、腹水、唾液、乳汁、尿液、肺泡灌洗液等；細(xì)胞外囊泡來源于腫瘤細(xì)胞及微環(huán)境，其表達(dá)變化特征可以反映細(xì)胞的表型及疾病的變化。這些特性使得細(xì)胞外囊泡成為了標(biāo)志物的最大優(yōu)勢(shì)，能夠提供簡便、可靠、穩(wěn)定的檢測(cè)。細(xì)胞外囊泡在腫瘤中發(fā)揮的重要作用能與其攜載的內(nèi)容物有關(guān)。研究已證實(shí)細(xì)胞外囊泡中富含非編碼RNA(miRNA、lncRNA、circRNA)、DNA以及蛋白質(zhì)等，細(xì)胞外囊泡中的這些內(nèi)含物一方面可以作為效應(yīng)分子發(fā)揮其生物學(xué)活性，參與并調(diào)控胃癌發(fā)生發(fā)展，另一方面這些效應(yīng)分子也反映腫瘤的狀態(tài)，是具有很大潛能的生物學(xué)標(biāo)志物。