[發(fā)明專利]一種脂肪酶及其在水解蝦青素酯中的應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110205046.7
• 申請日: 2021-02-24
• 公開（公告）號: CN112941049B
• 公開（公告）日: 2022-07-08
• 發(fā)明（設計）人: 毛相朝;孫建安;祖澤宇;高坤鵬
• 申請（專利權(quán)）人: 中國海洋大學
• 主分類號: C12N9/20
• 分類號: C12N9/20;C12N15/55;C12N15/81;C12N1/19;C12P23/00;C12R1/84
• 代理公司: 濟南光啟專利代理事務所(普通合伙) 37292
• 代理人: 張瑜

本發(fā)明公開了一種脂肪酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。編碼權(quán)該脂肪酶的基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。所述脂肪酶在水解蝦青素酯/制備蝦青素中的應用，水解條件為：最適溫度為30℃，最適pH為7.0～8.0。本發(fā)明還公開了一種重組載體和重組工程菌，包含有編碼脂肪酶的基因。本發(fā)明的脂肪酶，可以針對來源于雨生紅球藻的蝦青素酯進行高效水解，在優(yōu)化條件下水解蝦青素酯20h，蝦青素酯的水解率可達99.5％，較傳統(tǒng)皂化法明顯降低了副產(chǎn)物的產(chǎn)生，同時與其他酶水解法相比，水解效率也具有較大優(yōu)勢。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種脂肪酶，及其在水解蝦青素酯中的應用，屬于功能酶篩選及應用技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

脂肪酶是一類能夠水解甘油三酯的酯鍵，產(chǎn)生有利脂肪酸的生物酶，其也可以水解非甘油三酯的脂質(zhì)，產(chǎn)生相應的產(chǎn)物。其在自然界分布廣泛，從動物、植物、微生物體內(nèi)都可以分離到催化功能各異的脂肪酶。脂肪酶由于其優(yōu)良的催化效率和催化選擇性，在食品、農(nóng)業(yè)、工業(yè)等領(lǐng)域有著廣泛的應用。

蝦青素是類胡蘿卜素家族的重要一員，其分子結(jié)構(gòu)中的共軛雙鍵鏈及共軛雙鍵鏈末端的不飽和酮基和羥基，具有比較活潑的電子效應，能向自由基提供電子或吸引自由基的未配對電子，有效地猝滅氧化性極強的單線態(tài)活性氧以及環(huán)境中其他自由基，從而起到清除自由基和抗氧化作用，在食品和日化品領(lǐng)域有著很大的開發(fā)利用潛力。雨生紅球藻是天然蝦青素的最好來源之一，但其中大部分蝦青素都以蝦青素酯的形式存在，造成蝦青素的活性和穩(wěn)定性受到不同程度的影響。因此，如何有效水解蝦青素酯制備游離蝦青素，對蝦青素的高值化利用和功能產(chǎn)品開發(fā)具有較大意義。

脂肪酶以其高效的酯鍵水解活性，具備水解蝦青素酯制備游離蝦青素的應用潛力，但能夠?qū)ξr青素酯進行高效水解的專用脂肪酶的發(fā)掘與應用是實現(xiàn)游離蝦青素高效水解制備的關(guān)鍵因素。

發(fā)明內(nèi)容

針對上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明提供了一種能夠有效水解蝦青素酯制備游離蝦青素的脂肪酶。

本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的：

一種脂肪酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

SEQ ID NO.1：

MAPKPKLSFDRELDSLLPDYNDLIQLPEVNDILPPGVTHEEHTFLGPDKNPLILSIFRKESPPDSFPQKRPAIYHIHGGGMIMGNRFCTLSGPLEFVREHDAICTTIEYRLAPKHPYPAPIEGCYAGLVWVHEHAEELGIDSTRIVINGLSAGGGLAAGVALLCRDRKGPPLIGQSLFSPMIDDCNDSVSAHEFTGTGIWDRNANMAGWNAYLGDRRGSYNVNVYAAPIRAKNLTGLPPAYIDVGSTETFRDEDVQYAQNMWRDGTQCELHVWPGAYHGFEGLCPRAQLSIMARKARLDWLRRSLFC。

編碼上述脂肪酶的基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

SEQ ID NO.2：