[發明專利]高通量測量方法、引物及組合、試劑盒和樣本判斷方法在審
| 申請號： | 202110171921.4 | 申請日： | 2021-02-05 |
| 公開（公告）號： | CN112725439A | 公開（公告）日： | 2021-04-30 |
| 發明（設計）人： | 鮑遠亮;楊鋒;梁萌萌;姜玥 | 申請（專利權）人： | 蘇州賽福醫學檢驗有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/6883 | 分類號： | C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 南京九致知識產權代理事務所(普通合伙) 32307 | 代理人： | 嚴巧巧 |
| 地址： | 215123 江蘇省蘇州市蘇州工業園區星湖*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 通量 測量方法 引物 組合 試劑盒 樣本 判斷 方法 | ||
1.一種高通量測量方法，其特征在于：利用引物獲得TREC擴增產物和/或KREC擴增產物，構建測序文庫進行高通量測試。
2.根據權利要求1所述的高通量測量方法，其特征在于：擴增TREC時，在α和δ基因簇上的signal-joint環斷點為chr14:22386826-22386826和chr14:22475315-22475315；其中，上述α和δ基因簇的基因組版本為Hg38，坐標分別為chr14:21621904-22552132和chr14:22422546-22466577，TREC的signal_joint環的長度是88489bp。
3.根據權利要求1所述的高通量測量方法，其特征在于：擴增KREC時，signal-joint環斷點為chr2:88832772-88832772和chr2:88859608-88859608；其中，上述基因組版本為Hg38，坐標分別為chr14:21621904-22552132和chr14:22422546-22466577，KREC第二次刪除產生的signal_joint環的長度是26836bp。
4.引物，用于權利要求2中的高通量測量方法，其特征在于：擴增TREC的引物包括第一引物對和第二引物對，所述第一引物對用于擴增TREC的signal-joint環斷點連接處，所述第二對引物對用于擴增TREC的coding-joint斷點連接處；
擴增TREC的引物為以下兩批之一：
第1批中，第一引物對包括
引物1：TCAACCATGCTGACACCTCT；
引物2：GTTTTCGGCCGTGATTCGTC；
第二引物對包括
引物1：TCCTCAAGGGTCGAGACTGT；
引物2：GTGTTGGCTCCAAATGTCAGT；
第2批中，第一引物對包括
引物1：CCCTCTCCAAGGCAAAATGG；
引物2：CACTCCCCAGGATGGAAAACA；
第二引物對包括
引物1：ATCCTCAAGGGTCGAGACTG；
引物2：TGGCTCCAAATGTCAGTTTCCTA。
5.引物，用于權利要求3中的高通量測量方法，其特征在于：擴增KREC的引物包括第三引物對和第四引物對，所述第三引物對用于擴增KREC的signal-joint環斷點連接處，所述第四對引物用于擴增KREC的coding-joint斷點連接處；
擴增KREC的引物為以下兩批之一：
第1批中，第三引物對包括
引物1：CTTCTCCCTGGTTTTCCCAGC；
引物2：AGTTAAGGAGTAGGCAGGAGGA；
第四引物對包括
引物1：AGGCTTCCTAGGGAGGTCAG；
引物2：CCTGTGTCTGCCCGATTGAT；
第2批中，第三引物對包括
引物1：CCCAGCTCAGCGCCCATTACGTTT；
引物2：CCAGGAGCCAGCTCTTACCCTAGA；
第四引物對包括
引物1：AGGTTGTCCTAGGGAGCAGGGA；
引物2：TGCTGCCGTAGCCAGCTTTCC。
6.引物組合，其特征在于：包括上述權利要求4中的用于擴增TREC的引物和權利要求5中的用于擴增KREC的引物。
7.試劑盒，其特征在于：包括權利要求4或5中任意一種或多種引物。
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