[發明專利]一種乳制品中磺胺間二甲氧嘧啶的拉曼快速檢測方法

在審

• 申請號: 202110150340.2
• 申請日: 2021-02-03
• 公開（公告）號: CN112945931A
• 公開（公告）日: 2021-06-11
• 發明（設計）人: 趙志慧;周洋洋;陳娟;馬海建;李園;邵明華
• 申請（專利權）人: 上海如海光電科技有限公司;上海安譜實驗科技股份有限公司
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65;G01N1/34;G01N1/40
• 代理公司: 上海科律專利代理事務所(特殊普通合伙) 31290
• 代理人: 金碎平

本發明公開了一種乳制品中磺胺間二甲氧嘧啶的拉曼快速檢測方法，包括如下步驟：S1)樣品處理：稱取適量乳制品樣品，加入蛋白沉淀劑和有機提取溶劑，超聲或渦旋1?5min，4000rpm/min離心2?5min；取上清液加入凈化填料超聲或渦旋1?5min，4000rpm/min離心1?5min；取上層液體氮氣吹干，吹干后加入復溶液復溶形成待測液；S2)拉曼檢測：在拉曼檢測池中加入適量待測液、金屬溶膠和輔助增強試劑，混勻后檢測。本發明的檢測方法，操作簡便，檢測結果符合國標中磺胺間二甲氧嘧啶的要求，滿足各地海關口岸、時長監管部門的快速篩查、復核的檢測要求，且檢測時間短、成本低。

技術領域

本發明涉及一種乳制品檢測方法，尤其涉及一種乳制品中磺胺間二甲氧嘧啶的拉曼快速檢測方法。

背景技術

磺胺類藥物是指具有對氨基苯磺酰胺結構的一類藥物的總稱，是常用的廣譜抗菌藥。磺胺類藥物由于抗菌譜廣、高效、低毒和價格低廉，被廣泛用于動物養殖，用于細菌感染性疾病的預防和治療。由于磺胺類藥物在動物體內作用和代謝時間較長，往往造成動物可食性組織中磺胺類藥物的殘留，長期食用含磺胺類藥物殘留的食品，可能引起磺胺類藥物在體內的蓄積，使人體健康受到嚴重威脅。其危害性主要表現為人體內產生耐藥菌株導致過敏反應；損害免疫系統和血液系統造成造血紊亂；損害泌尿系統及致畸、致突變和致癌作用等。

目前，磺胺的主要檢測方法包括酶聯免疫法，固相萃取-高效液相色譜法，液相色譜-質譜法等。酶聯免疫法作為篩選方法得到廣泛應用，但容易出現假陽性。液相色譜法和液相色譜質譜法雖能獲得較精確的結果，但往往具有儀器設備昂貴、樣品處理方法復雜、檢測所需時間長等一系列問題，無法滿足目前食品安全問題頻發局面下，樣品檢測急需的實時性、現場性、有效性要求。因此研發出一種快速、便捷、靈敏性高的方法具有十分重要的意義。拉曼光譜分析方法具有信息豐富、無需樣品處理、檢測快速便捷、高特異性等優點，因此在食品或藥品檢驗中體現了獨特的優勢，它能反映出不具紅外活性的分子的對稱性振動和非極性基團的振動，因此拉曼光譜常常與紅外光譜結合在一起，共同對物質分子進行完整分析。但一般情況下，樣品的拉曼信號非常微弱，表面增強拉曼光譜(SERS)克服了傳統拉曼光譜靈敏度低的缺點，完全繼承了拉曼光譜特異性好、不受水的干擾、能夠提供豐富的分子結構信息、支持多組分同時檢測等優點，顯示出食品藥品現場快速檢測的優越能力。隨著便攜式拉曼光譜儀市場化，基于SERS的鑒定技術得到了迅速的發展。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種乳制品中磺胺間二甲氧嘧啶的拉曼快速檢測方法，能夠滿足磺胺間二甲氧嘧啶在乳制品等食品基質中簡單、快速、廉價、高靈敏度等方面的檢測需求。

本發明為解決上述技術問題而采用的技術方案是提供一種乳制品中磺胺間二甲氧嘧啶的拉曼快速檢測方法，包括如下步驟：S1)樣品處理：稱取適量乳制品樣品，加入蛋白沉淀劑和有機提取溶劑，超聲或渦旋1-5min，4000rpm/min離心2-5min；取上清液加入凈化填料超聲或渦旋1-5min，4000rpm/min離心1-5min；取上層液體氮氣吹干，吹干后加入復溶液復溶形成待測液；S2)拉曼檢測：在拉曼檢測池中加入適量待測液、金屬溶膠和輔助增強試劑，混勻后檢測。

進一步地，所述步驟S1中乳制品樣品為新鮮乳樣或牛奶制品。

進一步地，所述步驟S1中蛋白沉淀劑是質量濃度為20％-40％的乙酸鋅與飽和亞鐵氰化鉀的混合溶液，或者所述步驟S1中蛋白沉淀劑是質量濃度為8-15％的三氯乙酸水溶液。

進一步地，所述步驟S1中有機提取溶劑包括石油醚、乙酸乙酯和正己烷中的一種。

進一步地，所述步驟S1中樣品經渦旋和離心處理，直至發生明顯沉淀現象。

進一步地，所述步驟S1中凈化填料包括C18、中性氧化鋁和佛羅里硅土中的一種。

進一步地，所述步驟S1中復溶液為體積濃度為10％-20％的乙醇水溶液和體積濃度為10％-20％的甲醇水溶液中的一種，加入體積為200-500μL。