[發明專利]一株武夷菌素高產菌株、發酵方法及應用

有效

• 申請號: 202110123977.2
• 申請日: 2021-01-29
• 公開（公告）號: CN112877237B
• 公開（公告）日: 2022-05-03
• 發明（設計）人: 施李鳴;葛蓓孛;張克誠;韋秋合;楊淼泠;張維
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院植物保護研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N13/00;C12N15/01;C12P19/38;A01N43/54;A01N63/28;A01P3/00;C12R1/465
• 代理公司: 北京文慧專利代理事務所(特殊普通合伙) 11955
• 代理人: 戴麗偉

本發明涉及一株武夷菌素高產菌株、發酵方法及應用。菌株的保藏號為CGMCC No.19060。該菌株的發酵方法，包括以下步驟：將菌株接種到培養基，發酵培養。該菌株可以用于制備武夷菌素，并且菌株的發酵液對多種致病菌具有很好的抑菌作用。本發明所述菌株具有生長快、產孢多、武夷菌素產量高、效價高且穩定等優點。

技術領域

本發明屬于生物工程技術領域，尤其涉及一株武夷菌素高產菌株、發酵 方法及應用。

背景技術

武夷菌素是一種具有我國完全自主知識產權的低毒、高效、廣譜、環保 的新型農用抗生素(化學結構式如式1所示)，由不吸水鏈霉菌武夷變種發 酵生產，對蔬菜和果樹等多種作物的真菌性病害具有明顯的防治效果，在農 業生產中得到了廣泛的應用，創造了可觀的經濟、社會和生態效益。但是目 前在生產中面臨菌種退化、發酵效價低、生產成本高的問題，制約了武夷菌 素的產業化。

高產菌株選育通常采用物理誘變(紫外、γ-射線、激光等)、化學誘 變(亞硝基胍、乙烯亞胺、硫酸二乙酯等)和基因工程育種等。其中，由于 有些微生物對傳統的物理誘變方法非常敏感，致死效應遠大于誘變效應；化 學誘變劑大都有毒，而且很多又是致癌物，其殘留物、揮發物或者蒸汽等均 會對操作者的身體和周圍環境造成危害；基因工程育種需要較長的周期和較 高的費用。

在前期武夷菌素高產菌株的選育過程中，采用物理、化學和高能粒子注 入相結合技術選育出高產菌株F64，發酵液效價提高150-200％，但是選育過 程復雜、周期漫長，且涉及到⁶⁰Co_γ射線、化學誘變劑等，具有一定的危險性； 采用基因工程技術選育出高產菌株W273，發酵液效價提高了132-317％，但 是過程復雜、周期漫長、費用昂貴。另外，菌株在生產過程中一直面臨退化 的問題，因此迫切需要一種新的簡便、高效、環保、安全的方法選育高產菌 株。

常壓室溫等離子體(Atmospheric Room Temperature Plasma，ARTP) 是近年來興起的一種誘變育種新技術，是在常壓下產生的具有高活性粒子的 等離子體射流，離子體射流的溫度可以控制在25-40℃之間；ARTP可以對 生物胞內DNA物質造成顯著損傷，并誘發細胞發生突變；與傳統的誘變技術 相比較，ARTP誘變育種技術具有突變率高、突變位點豐富和操作簡便安全等 優點，已經廣泛用于細菌、放線菌、藻類、酵母、霉菌和大型真菌等領域。但是ARTP技術獲得的突變菌株具有一定的隨機性，并且突變后篩選工作量 大，突變隨機性強，且容易產生回復突變、菌株不穩定等問題，因此，能否 獲得正向突變的武夷菌素高產菌株也是未知的。

發明內容

鑒于現有技術所存在的問題，本發明提供一株武夷菌素高產菌株、發酵 方法及應用。該菌株具有生長快、產孢多、武夷菌素產量高、效價高且穩定 等優點。

本發明解決上述技術問題的技術方案如下：

本發明提供一株武夷菌素高產菌株，保藏號為CGMCC No.19060。本發明 針對目前武夷菌素產生菌株退化、發酵效價低、生產成本高的問題，采用一 種新方法選育出一株武夷菌素高產菌株，在本發明實施例中將其命名為M28， 分類學名稱為不吸水鏈霉菌武夷變種M28(英文名稱:Streptomyces ahygroscopicus var.wuyiensis strain M28)，該菌株已于2019年12月 02日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC)，保藏號為CGMCC No.19060，保藏地址為：中國北京。