[發明專利]一種β冠狀病毒抗原、其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202110120079.1
• 申請日: 2020-06-23
• 公開（公告）號: CN113416259B
• 公開（公告）日: 2023-04-18
• 發明（設計）人: 戴連攀;嚴景華;高福;李燕;鄭天依;徐坤;劉梅;安亞玲;施一
• 申請（專利權）人: 中國科學院微生物研究所
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/85;C12N15/70;C12N5/10;A61K39/215;A61P31/14;A61P11/00
• 代理公司: 北京悅和知識產權代理有限公司 11714
• 代理人: 司麗春;田昕

1.一種β冠狀病毒抗原，其特征在于：所述β冠狀病毒選自：嚴重呼吸綜合征冠狀病毒、中東呼吸綜合征冠狀病毒和2019新型冠狀病毒，所述β冠狀病毒抗原具備免疫原性，其氨基酸序列包括：按照(A-B)-(A-B)樣式排列的氨基酸序列或(A-B)-C-(A-B)樣式排列的氨基酸序列，其中：A-B表示β冠狀病毒的表面刺突蛋白的受體結合區的部分氨基酸序列或全部氨基酸序列，其滿足以下條件：1）落在中東呼吸綜合征冠狀病毒的表面刺突蛋白的受體結合區的從E367位點至C603位點的區域或其它β冠狀病毒的對應區域之內，并且，2）包含中東呼吸綜合征冠狀病毒的表面刺突蛋白的受體結合區的從E367位點至D593位點的區域或其它β冠狀病毒的對應區域；C表示連接氨基酸序列(GGS)_n，其中n表示GGS的個數，n為≥1的整數；所述β冠狀病毒抗原為單鏈二聚體結構。

2.根據權利要求1所述的β冠狀病毒抗原，其特征在于，所述連接氨基酸序列(GGS)_n連接序列中，n為選自1-10的整數。

3.根據權利要求1所述的β冠狀病毒抗原，其特征在于，所述連接氨基酸序列(GGS)_n連接序列中，n為選自1-5的整數。

4.一種制備權利要求1-3之一所述的β冠狀病毒抗原的方法，其特征在于，包括以下步驟：在編碼權利要求1-3之一所述的β冠狀病毒抗原的核苷酸序列的5’端加入編碼信號肽的序列，3’端加上終止密碼子，進行克隆表達，篩選正確的重組子，然后轉染表達系統的細胞進行表達，表達后收集細胞上清，純化得到β冠狀病毒抗原。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述表達系統的細胞包括為哺乳動物細胞、昆蟲細胞、酵母細胞或細菌細胞。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述哺乳動物細胞包括293T細胞或CHO細胞，所述細菌細胞包括大腸桿菌細胞。

7.一種編碼權利要求1-3之一所述的β冠狀病毒抗原的核苷酸。

8.一種包括權利要求7所述的核苷酸的重組載體。

9.一種包括權利要求8所述的重組載體的表達系統細胞。

10.一種權利要求1-3之一所述的β冠狀病毒抗原、權利要求7所述的核苷酸、權利要求8所述的重組載體、權利要求9所述的表達系統細胞在制備β冠狀病毒疫苗中的應用。

11.一種β冠狀病毒疫苗，其特征在于，包括權利要求1-3之一所述的β冠狀病毒抗原和佐劑。

12.根據權利要求11所述的β冠狀病毒疫苗，其特征在于，所述佐劑選自鋁佐劑、MF59佐劑或類MF59佐劑。

13.一種β冠狀病毒DNA疫苗，其特征在于，包括有：包含編碼權利要求1-3之一所述的β冠狀病毒抗原的DNA序列的重組載體。

14.一種β冠狀病毒mRNA疫苗，其特征在于，包括有：包含編碼權利要求1-3之一所述的β冠狀病毒抗原的mRNA序列的重組載體。

15.一種β冠狀病毒病毒載體疫苗，其特征在于，包括有：包含編碼權利要求1-3之一所述的β冠狀病毒抗原的核苷酸序列的重組病毒載體。

16.根據權利要求15所述的β冠狀病毒病毒載體疫苗，其特征在于，病毒載體選自以下的一種或幾種：腺病毒載體、痘病毒載體、流感病毒載體、腺相關病毒載體。