[發(fā)明專利]一種甜葉菊萊鮑迪苷D快速檢測(cè)模型的建立方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110119145.3
• 申請(qǐng)日: 2021-01-28
• 公開（公告）號(hào): CN112945898A
• 公開（公告）日: 2021-06-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳建國(guó);朱志玉;韓佳慧;朱祝軍;祝彪;許盛龍;傅敏杰;鄭文;張萼
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江農(nóng)林大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N21/359
• 分類號(hào): G01N21/359;G01N21/3563;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/36;G06F17/18
• 代理公司: 北京金智普華知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11401
• 代理人: 張曉博

1.一種甜葉菊萊鮑迪苷D快速檢測(cè)模型的建立方法，其特征在于，所述模型的建立方法包括以下步驟：

（1）分析樣品準(zhǔn)備，收集遺傳上有多樣化的甜葉菊樣品；

（2）樣品集的確定，用近紅外光譜儀采集所述甜葉菊樣品的近紅外光譜，光譜掃描范圍為4000～10000 cm^-1；

（3）根據(jù)光譜選擇具有代表性的甜葉菊干葉粉樣作為定標(biāo)樣品集和檢驗(yàn)樣品集；

（4）甜葉菊萊鮑迪苷D含量測(cè)定，用高效液相色譜法處理分析定標(biāo)樣品集和檢驗(yàn)樣品集中甜葉菊樣品的萊鮑迪苷D含量；

（5）對(duì)定標(biāo)樣品集近紅外光數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理，包括數(shù)學(xué)處理和散射處理，以此消除干擾變量；

（6）根據(jù)定標(biāo)樣品集預(yù)處理后的甜葉菊干葉近紅外光譜與甜葉菊萊鮑迪苷D含量之間的關(guān)系建立回歸方程，使用偏最小二乘回歸（PLS），構(gòu)建甜葉菊干葉粉樣品中萊鮑迪苷D含量定標(biāo)方程模型；

（7）應(yīng)用檢驗(yàn)樣品集對(duì)定標(biāo)方程的預(yù)測(cè)性能進(jìn)行評(píng)價(jià)，建立近紅外快速分析檢測(cè)模型。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種甜葉菊萊鮑迪苷D快速檢測(cè)模型的建立方法，其特征在于，步驟（1）中所述甜葉菊樣品采集依據(jù)和前處理方法為：采集對(duì)象為分支多，葉片多且厚，無枯葉和深色葉，無嚴(yán)重病蟲害的植株，各種大小葉形、葉色深淺均收，采集于單株現(xiàn)蕾期，收割5～8 個(gè)分枝，置于陰涼下晾24 h，再干燥，后手工脫葉，葉片粉碎，過60 目篩。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種甜葉菊萊鮑迪苷D快速檢測(cè)模型的建立方法，其特征在于，步驟（2）中所述近紅外光譜，樣品重復(fù)掃描次數(shù)是64 次，分辨率為8 cm^-1，每次樣品光譜采集前均要用近紅外掃描30 秒，作為背景光譜的內(nèi)置參照。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種甜葉菊萊鮑迪苷D快速檢測(cè)模型的建立方法，其特征在于，步驟（4）中所述定標(biāo)樣品集中萊鮑迪苷D含量范圍包含檢驗(yàn)樣品集中萊鮑迪苷D的含量范圍。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種甜葉菊萊鮑迪苷D快速檢測(cè)模型的建立方法，其特征在于，步驟（4）中所述高效液相色譜法處理分析方法為：將甜葉菊粉于50 ℃烘箱中烘烤24 h至恒重，稱取干燥的甜葉菊粉0.5 g，置15 mL離心管中，加入5 mL提取劑，混勻儀混勻，在超聲儀中超聲30 min，6000 r/min室溫離心5 min，將上清液倒入另一個(gè)15 ml離心管中，殘?jiān)性俅渭尤? mL提取劑，混勻儀混勻，超聲30 min，6000 r/min室溫離心5 min，合并2 次上清液，混勻儀混勻，6000 r/min室溫離心5 min，吸取1.5 mL樣品上清液，用0.45 μm針式微孔濾膜過濾后進(jìn)樣。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種甜葉菊萊鮑迪苷D快速檢測(cè)模型的建立方法，其特征在于，步驟（5）中所述數(shù)學(xué)處理，是在pathlength type中依次采用一階導(dǎo)數(shù)與二階導(dǎo)數(shù)對(duì)甜葉菊粉樣的初始光譜做運(yùn)行計(jì)算，所述散射處理為散射校正法（MSC）。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種甜葉菊萊鮑迪苷D快速檢測(cè)模型的建立方法，其特征在于，步驟（6）中所述定標(biāo)方程，其校正標(biāo)準(zhǔn)差（RMSEC）為0.174，驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)差（RMSEP）為0.118，校正相關(guān)系數(shù)（RSQ）為0.898，驗(yàn)證相關(guān)系數(shù)（R²）為0.872，相對(duì)分析誤差RPD（SD/SEP）值為3.170。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種甜葉菊萊鮑迪苷D快速檢測(cè)模型的建立方法，其特征在于，步驟（7）中所述近紅外快速分析檢測(cè)模型在后期工作中需不斷增添具有代表性的甜葉菊樣本，以保證模型的穩(wěn)定性和可靠性。

9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種甜葉菊萊鮑迪苷D快速檢測(cè)模型的建立方法，其特征在于，所述采用一階導(dǎo)數(shù)對(duì)甜葉菊粉樣的初始光譜運(yùn)行計(jì)算后，其光譜圖像的波段起伏更顯著，峰變化顯示更為陡峭清晰，除去了光譜基線平移背景信息。

10.權(quán)利要求1～9任一項(xiàng)所述的一種甜葉菊萊鮑迪苷D快速檢測(cè)模型的建立方法，應(yīng)用于快速分析檢測(cè)甜葉菊萊鮑迪苷D的含量。