[發(fā)明專利]一種應(yīng)用生物炭促進(jìn)生物還原亞硒酸鹽的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110103953.0
• 申請日: 2021-01-26
• 公開（公告）號: CN112852887A
• 公開（公告）日: 2021-05-28
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 柳廣飛;武秋月;金若菲;周集體
• 申請（專利權(quán)）人: 大連理工大學(xué)
• 主分類號: C12P3/00
• 分類號: C12P3/00;C12N1/20;C12R1/01
• 代理公司: 大連理工大學(xué)專利中心 21200
• 代理人: 溫福雪

1.一種應(yīng)用生物炭促進(jìn)生物還原亞硒酸鹽的方法，其特征在于包括如下步驟：

(1)微生物的培養(yǎng)：采用胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基培養(yǎng)Shewanella oneidensis MR-1，作為還原Se(IV)的菌種；調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH至7.2，并在121℃，30min的條件下高壓蒸汽滅菌；S.oneidensis MR-1在無菌操作臺接種至胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基；接種后的胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基在30℃，150rpm恒溫?fù)u床中培養(yǎng)13h，得到對數(shù)生長期末期的S.oneidensis MR-1菌液備用；

(2)配制25mM哌嗪-1,4-二乙磺酸緩沖溶液，加入乳酸鈉，乳酸鈉的終濃度為25mM，并轉(zhuǎn)移至玻璃厭氧瓶中，以0.15mM的NaOH調(diào)節(jié)pH至7.0；通入氮氣曝氣將厭氧瓶頂空及水溶液中的氧氣排盡后，放入高壓蒸汽滅菌鍋滅菌，冷卻至室溫后轉(zhuǎn)移至厭氧箱中以確保體系始終處于厭氧狀態(tài)；

(3)配制40mM的亞硒酸鈉溶液；

(4)在厭氧箱中，用移液槍吸取亞硒酸鈉溶液轉(zhuǎn)移至步驟(2)的厭氧瓶中，亞硒酸鈉的終濃度為0.1-2mM；

(5)稱取生物炭，并在厭氧箱中轉(zhuǎn)移到厭氧瓶中，生物炭在厭氧瓶中的濃度為0.2-5g/L，超聲使其均勻分散在溶液中；

(6)收集培養(yǎng)至對數(shù)期末期的微生物細(xì)胞，并轉(zhuǎn)移至厭氧瓶中，使體系光密度OD₆₀₀＝0.3-1.5；然后將厭氧瓶放入150rpm，30℃恒溫?fù)u床中，避光反應(yīng)1-6d。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用生物炭促進(jìn)生物還原亞硒酸鈉的方法，其特征在于，所述的步驟(5)中用來促進(jìn)微生物還原亞硒酸鈉的生物炭是慢速限氧熱解法制備的生物炭。