[發明專利]柔紅霉素的進罐種子的培養方法

在審

• 申請號: 202110097848.0
• 申請日: 2021-01-25
• 公開（公告）號: CN113151379A
• 公開（公告）日: 2021-07-23
• 發明（設計）人: 袁異;張幀;吳相偉;張春蘭;朱文杰
• 申請（專利權）人: 道中道（菏澤）制藥有限公司
• 主分類號: C12P19/56
• 分類號: C12P19/56
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種柔紅霉素的進罐種子的培養方法，其特征在于，其步驟如下：

S1：菌種活化：將菌種在培養基中于25-29℃下活化培養10-14天，待長出單菌落后，轉接至固體斜面培養基上，培養得到菌體，待用；

S2：搖瓶發酵培養：將活化后的菌株制成菌懸液，而后按1-5％體積的接種量將柔紅霉素菌懸液接種到搖瓶發酵培養基中，以170-190轉/分鐘的轉速，25-30℃振蕩培養40-52小時，即得搖瓶發酵培養液；

S3：種子罐培養：將搖瓶發酵培養液按1％-10％體積接種量接入種子罐中，溫度：27-29℃、通風比為：0.05-0.22V/V·m、攪拌速率：160-200rpm、罐壓：0.05-0.12Mpa、發酵培養24小時，得種子培養液；柔紅霉素發酵種子罐培養過程按照培養時間分為3個階段：培養0-12h階段；培養12-16h階段；培養16-24h階段；

其中培養0-12h階段，控制培養溫度：27℃；罐壓：0.05-0.10MPa；通風比V/V·min：0.05-0.08；攪拌速率：160-180rpm；

培養12-16h階段，控制培養溫度：調節降溫系統，通過菌種生長產生的熱量將罐溫升溫至28℃；罐壓：0.08-0.10MPa；通風比V/V·min：0.12-0.14，攪拌速率：180-200rpm；

培養16-24h階段，控制培養溫度：29℃；罐壓：0.10-0.12MPa；通風比V/V·min：0.20-0.22；攪拌速率：180-200rpm；

S4：發酵罐培養：按3-3.5％體積的接種量將種子培養液接入發酵罐中，通入無菌空氣在26-29℃、攪拌速率180-200rpm、罐壓0.05-0.12Mpa、發酵培養120-180小時，得到柔紅霉素發酵液。

2.根據權利要求1所述的柔紅霉素的進罐種子的培養方法，其特征在于：在步驟S3中12-16h階段流加葡萄糖，控制葡萄糖濃度大于0.3％。

3.根據權利要求1所述的柔紅霉素的進罐種子的培養方法，其特征在于：所述步驟S1中的培養基中含有馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂。

4.根據權利要求1所述的柔紅霉素的進罐種子的培養方法，其特征在于：所述步驟S3中種子罐在128℃下蒸汽空消滅菌30分鐘，裝入種子培養基后再120℃蒸汽滅菌30分鐘，保壓降溫25-30℃，而后接種搖瓶發酵培養液，種子培養基裝量為罐體積的60-70％。