[發明專利]一種促凝血桃花有效成分及其提取分離方法和應用

有效

• 申請號: 202110080410.1
• 申請日: 2021-01-21
• 公開（公告）號: CN112645996B
• 公開（公告）日: 2023-03-17
• 發明（設計）人: 張娟娟;康文藝;尹震花;張偉;陳林
• 申請（專利權）人: 黃河科技學院
• 主分類號: C07H17/07
• 分類號: C07H17/07;C07H1/08;A61P7/04;A61K36/736;A61K31/7048
• 代理公司: 鄭州聯科專利事務所(普通合伙) 41104
• 代理人: 楊海霞

1.一種促凝血桃花有效成分的提取分離方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）以干燥、粉粹后的桃花為原料，用石油醚浸提，石油醚浸提結束后過濾，回收濾渣，然后用乙醇室溫浸提，乙醇浸提結束后，過濾、濃縮，得乙醇總浸膏；將乙醇總浸膏分散于少量水中形成分散液，依次用溶劑石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，回收溶劑，得到石油醚部位、乙酸乙酯部位及正丁醇部位；

2）將步驟1）所得正丁醇部位采用硅膠柱色譜分離，用二氯甲烷-甲醇進行梯度洗脫，以硅膠薄層色譜檢測合并，得到8個組分，按照所得組分極性由小到大依次標記為組分1~8；

3）將步驟2）所得組分4，經硅膠柱色譜分離，以二氯甲烷-甲醇進行梯度洗脫，經硅膠薄層色譜檢測，合并相同組分并減壓回收溶劑，得到3個亞組分，按照所得組分極性由小到大依次標記為Fr.4.1、Fr.4.2、Fr.4.3；Fr.4.3先經硅膠柱色譜分離，然后用Sephadex LH-20凝膠柱色譜純化，薄層色譜檢測、合并相同組分并減壓濃縮回收溶劑、干燥，得到化合物1；

4）將步驟2）所得組分7，經硅膠柱色譜分離，以二氯甲烷-甲醇進行梯度洗脫，經硅膠薄層色譜檢測，合并相同組分并減壓回收溶劑，得到4個亞組分，按照所得組分極性由小到大依次標記為Fr.7.1、Fr.7.2、Fr.7.3、Fr.7.4；Fr.7.2經Sephadex LH-20凝膠柱色譜純化，薄層色譜檢測、合并相同組分并減壓濃縮回收溶劑、干燥，得到化合物2；

化合物1和/或2即為促凝血桃花有效成分；

化合物1、2的結構如下所示：

；

步驟2）中，硅膠柱色譜分離時，用體積比100:0、100:1、100:2、100:4、100:8、100:16、100:32、0:100的二氯甲烷-甲醇進行梯度洗脫；

步驟3）中，硅膠柱色譜分離時，用體積比20:1~2:1的二氯甲烷-甲醇進行梯度洗脫；Sephadex LH-20凝膠柱色譜純化時，以甲醇為洗脫液；

步驟4）中，硅膠柱色譜分離時，用體積比15:1~1:1的二氯甲烷-甲醇進行梯度洗脫；Sephadex LH-20凝膠柱色譜純化時，以體積比1:1的二氯甲烷-甲醇為洗脫液。

2.根據權利要求1所述促凝血桃花有效成分的提取分離方法，其特征在于，步驟1）中，干燥、粉粹后的桃花在室溫下用石油醚浸提2~4次，每次3~4 d。

3.根據權利要求1所述促凝血桃花有效成分的提取分離方法，其特征在于，步驟1）中，用體積濃度70~80%的乙醇在室溫下浸提濾渣，浸提2~4次，每次3~4 d，乙醇浸提結束后合并乙醇浸提液，過濾、濃縮，得乙醇總浸膏。