[發明專利]一種多竇聯合的腦靜脈血栓動物模型及其構建方法

有效

• 申請號: 202110056611.8
• 申請日: 2021-01-15
• 公開（公告）號: CN112889746B
• 公開（公告）日: 2023-01-20
• 發明（設計）人: 段建鋼;肖立坡;吉訓明
• 申請（專利權）人: 首都醫科大學宣武醫院
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02
• 代理公司: 北京開陽星知識產權代理有限公司 11710
• 代理人: 王璐

本發明涉及醫藥技術領域，具體公開了一種多竇聯合的腦靜脈血栓動物模型及其構建方法。本發明通過半結扎聯合氯化鐵和凝血酶的方法，誘導出多個靜脈竇聯合血栓(如上矢狀竇+橫竇，上矢狀竇+橫竇+頸內靜脈)，大面積靜脈性腦梗死，腦出血等病理變化，且神經功能缺損更加嚴重、血栓持續時間更長的重癥CVT動物模型，可用于重癥CVT病理生理機制的研究和治療策略的研究及評估，從而可能更有利于重癥CVT患者的治療和促進良好的預后、探尋新靶點和研發新型藥物，以降低重癥CVT患者的死亡率。

技術領域

本發明涉及醫藥技術領域，尤其涉及一種腦靜脈血栓動物模型。

背景技術

顱內靜脈系統血栓形成(cerebral venous thrombosis,CVT)是一種不同于動脈性卒中的特殊類型的腦血管疾病，主要影響年輕人和兒童，是青年和中年卒中的重要原因，發病率有逐年增加的趨勢，一項來自澳大利亞的流行病學調查顯示，CVT年發病率為1.57/10萬人/年，比以前報道的1.3/10萬人更高，病變部位依次為多靜脈竇[57.14％]、上矢狀竇[16.19％]、橫竇[11.43％]和乙狀竇[8.57％]。約60％的CVT患者發生靜脈性腦梗死或出血，即由閉塞的腦靜脈竇或皮層靜脈引起的腦組織局部水腫、出血。有靜脈性腦梗死或出血的CVT屬于重癥CVT范疇，患者常有更嚴重的臨床表現和更差的預后。有報道稱，盡管顱內靜脈血栓死亡率隨著診療技術的發展在降低，但是嚴重的顱內靜脈血栓患者死亡率仍高達34.2％，這可能與重癥CVT的病理生理學機制目前仍然不是很清楚有關系。然而，腦靜脈血栓動物模型對探討其發病機制、病理生理學過程和治療策略具有重要價值。

CVT動物模型能用來模擬人類的顱內靜脈竇血栓形成，通過研究動物疾病模型，以便于對CVT這種疾病的病因及病理生理過程進行更深入的研究和探討，從而有利于研發新的治療靶點，促進疾病良好轉歸，所以CVT動物模型的科研價值是巨大的。

目前的CVT動物模型有永久性結扎型、臨時阻斷型、化學誘導型、介入型或插管型、植入自制移植物型、雙極電凝型。永久性結扎型模型，能誘導上矢狀竇血栓、靜脈性腦梗死、腦出血病理變化，但是永久性結扎限制了治療策略的研究；臨時阻斷型，操作簡單，但是血栓不穩定；化學誘導型，同樣也是操作簡單，但是血栓不穩定，不能持續一周；介入或插管型，能誘導出上矢狀竇血栓、靜脈性腦梗死，但是操作比較復雜,耗材高昂；植入自制移植物型，操作簡單，模擬上矢狀竇血栓，但不是真正意義上的血栓形成，且不能用于治療策略的研究；雙極電凝型，適合研究皮層靜脈血栓，但是創傷比較大。各類型模型優缺點見下表(表1引自中國現代神經疾病雜志)。

表1.各種腦靜脈血栓模型制作方法優缺點

以上動物模型大部分誘導的單純上矢狀竇血栓，多竇聯合血栓并且合并大面積靜脈性腦梗死的重癥CVT模型，目前國內外尚未見報道。而臨床工作中以多竇聯合血栓患者最為多見，所以，目前急需一種能模擬多竇聯合的、人類重癥CVT的動物模型。

發明內容

為了解決現有技術中存在的問題，本發明的目的是提供一種多竇聯合的腦靜脈血栓動物模型及其構建方法。

為了實現本發明目的，本發明的技術方案如下：

第一方面，本發明提供了一種多竇聯合的腦靜脈血栓動物模型的制備方法，包括如下步驟：

(1)以非人動物為動物模型構建對象，麻醉后采用非吸收性外科縫線對上矢狀竇(sss)進行半結扎；

(2)結扎后，在上矢狀竇表面貼敷20～40％氯化鐵溶液，貼敷時間為5～10分鐘；優選采用40％氯化鐵溶液貼敷5分鐘；

(3)向上矢狀竇的竇腔內注射凝血酶溶液，凝血酶的注射總量為150u。