[發明專利]基于一步法RT-PCR技術檢測或輔助檢測南方番茄病毒的引物對和方法

在審

• 申請號: 202110051440.X
• 申請日: 2021-01-14
• 公開（公告）號: CN112626275A
• 公開（公告）日: 2021-04-09
• 發明（設計）人: 邱艷紅;徐秀蘭;張海軍;田文;趙桂新
• 申請（專利權）人: 北京市農林科學院
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 張羽

1.用于檢測或輔助檢測南方番茄病毒的引物對，由引物STV-812-F和引物STV-812-R組成；

所述STV-812-F為如下(a1)或(a2)；

(a1)序列表的SEQ ID No.1所示的單鏈DNA分子；

(a2)將SEQ ID No.1經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與SEQ IDNo.1具有相同功能的DNA分子；

所述STV-812-R為如下(a3)或(a4)；

(a3)序列表的SEQ ID No.2所示的單鏈DNA分子；

(a4)將SEQ ID No.2經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與SEQ IDNo.2具有相同功能的DNA分子。

2.用于檢測或輔助檢測南方番茄病毒的試劑，其特征在于：所述試劑含有權利要求1所述的引物對。

3.根據權利要求2所述的試劑，其特征在于：所述引物STV-812-F和所述引物STV-812-R的摩爾比為1∶1。

4.用于檢測或輔助南方番茄病毒的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒含有權利要求1所述的引物對或權利要求2或3所述的試劑。

5.權利要求1所述的引物對或權利要求2或3所述的試劑或權利要求4所述的試劑盒在如下(b1)-(b6)中的任一種應用：

(b1)檢測或輔助檢測南方番茄病毒中的應用；

(b2)制備檢測或輔助檢測南方番茄病毒的產品中的應用；

(b3)檢測或輔助檢測待測植物材料是否感染南方番茄病毒中的應用；

(b4)制備檢測或輔助檢測待測植物材料是否感染南方番茄病毒的產品中的應用；

(b5)檢測或輔助檢測待測病毒是否為南方番茄病毒中的應用；

(b6)制備檢測或輔助檢測待測病毒是否為南方番茄病毒的產品中的應用。

6.一種檢測或輔助檢測待測植物材料是否感染南方番茄病毒的方法，其特征在于：包括

(c1)采用權利要求1所述的引物對對所述待測植物材料的總RNA進行RT-PCR擴增，得到擴增產物；

(c2)根據所述擴增產物確定所述待測植物材料是否感染或候選感染南方番茄病毒。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于：所述步驟(c2)包括若所述擴增產物含有812bp的DNA片段，則所述待測植物材料感染或候選感染南方番茄病毒；若所述擴增產物不含有812bp的DNA片段，則所述待測植物材料未感染或候選未感染南方番茄病毒。

8.一種檢測或輔助檢測待測病毒是否為南方番茄病毒的方法，其特征在于：包括

(d1)采用權利要求1所述的引物對對所述待測病毒的總RNA進行RT-PCR擴增，得到擴增產物；

(d2)根據所述擴增產物判斷所述待測病毒是否感染或候選感染南方番茄病毒。

9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于：所述步驟(d2)包括若所述擴增產物含有812bp的DNA片段，則所述待測病毒為或候選為南方番茄病毒；若所述擴增產物不含有812bp的DNA片段，則所述待測病毒不為或候選不為南方番茄病毒。

10.根據權利要求7或9所述的方法，其特征在于：所述812bp的DNA片段為序列表中SEQID No.3所示的DNA片段。