[發明專利]一種豬血木組織培養方法

有效

• 申請號: 202110050053.4
• 申請日: 2021-01-14
• 公開（公告）號: CN112690215B
• 公開（公告）日: 2022-06-07
• 發明（設計）人: 曾宋君;熊玉萍;文香英;張雪蓮;陳雙艷;楊科明;吳坤林;房林;李琳;馬國華
• 申請（專利權）人: 中國科學院華南植物園
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001
• 代理人: 朱雙;劉明星

1.一種豬血木組織培養方法，其特征在于，包括以下步驟：

a.取豬血木發育良好的種子，經消毒處理后，接種到種子萌發培養基上培養；所述的種子萌發培養基，每升由以下成分組成：20-30g蔗糖、6g瓊脂，余量為1/2MS培養基，pH5.8-6.0；

b.待種子發芽長至苗高1-2厘米時，切取下胚軸接種到不定芽誘導培養基上進行不定芽的誘導；所述的不定芽誘導培養基，每升由以下成分組成：1-5mg KT、20-30mL椰子汁、20-30g蔗糖、6g瓊脂，余量為改良的MS培養基，pH 5.8-6.0；所述的改良的MS培養基是將MS培養基中的硝酸鉀替換為990mg/L的硫酸鉀；

c.將誘導出的不定芽切割成單芽或雙芽后繼代培養于增殖培養基進行不定芽的增殖培養；所述的增殖培養基，每升由以下成分組成：1-2mg 6-BA、5-15mL椰子汁、20-30g蔗糖、6g瓊脂，余量為改良的MS培養基，pH 5.8-6.0；所述的改良的MS培養基是將MS培養基中的硝酸鉀替換為990mg/L的硫酸鉀；

d.將增殖培養獲得的2-3厘米高的叢生芽切成單芽后，接種到壯苗培養基進行壯苗培養；所述的壯苗培養基，每升由以下成分組成：20-30g蔗糖、6g瓊脂，余量為改良的MS培養基，pH 5.8-6.0；所述的改良的MS培養基是將MS培養基中的硝酸鉀替換為990mg/L的硫酸鉀；

e.將壯苗培養獲得的高3-4厘米的試管苗，在自然光照溫室條件下煉苗7-10天；然后取出試管苗，放入3-5mg/L IBA溶液中浸泡10-30分鐘，然后移栽到生根基質中進行生根培養；所述的生根基質是將珍珠巖和蛭石以體積比1-3：1混合得到的；

f.生根培養苗長至6-8厘米高時，進行定植栽培；所述的步驟f的栽培基質為將椰糠、泥炭土、珍珠巖基質以體積比2-4：2-4：1混合得到的。

2.根據權利要求1所述的豬血木組織培養方法，其特征在于，所述的消毒處理具體為：將種子先在體積分數75％乙醇水溶液中浸泡10-30秒，再用質量分數0.1％升汞溶液消毒5-10分鐘，無菌水沖洗4-5次。

3.根據權利要求1所述的豬血木組織培養方法，其特征在于，所述的步驟a-c中培養條件為：溫度24-28℃，光照度1500-2000lx，光照12-16小時/天。

4.根據權利要求1所述的豬血木組織培養方法，其特征在于，所述的步驟d中培養條件為：溫度24-28℃，光照度2000-2500lx，光照12-16小時/天。