[發(fā)明專利]下調(diào)YTHDF2蛋白表達(dá)的物質(zhì)及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110041347.0
• 申請(qǐng)日: 2021-01-13
• 公開（公告）號(hào): CN112791094B
• 公開（公告）日: 2021-12-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 季勇;仲艷青;游黛婷;李雪松
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K31/713
• 分類號(hào): A61K31/713;A61K48/00;A61P9/10
• 代理公司: 江蘇圣典律師事務(wù)所 32237
• 代理人: 楊文晰

本發(fā)明涉及基因工程技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種下調(diào)YTHDF2蛋白表達(dá)的物質(zhì)及其應(yīng)用；該下調(diào)YTHDF2蛋白表達(dá)的物質(zhì)包括基于YTHDF2的小干擾RNA或YTHDF2shRNA的內(nèi)皮特異性腺相關(guān)病毒，可應(yīng)用于制備治療心血管疾病藥物；本發(fā)明開拓了動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)血管疾病防治藥物制備的新方法，對(duì)于動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)血管疾病的防治提供了新的方向。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及基因工程技術(shù)領(lǐng)域，特別是一種下調(diào)YTHDF2蛋白表達(dá)的物質(zhì)及其在制備治療心血管疾病藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

心血管疾病(Cardiovascular disease,CVD)是目前全球威脅人類健康最嚴(yán)重的疾病。心血管疾病可由多種因素引起，一些不良的生活習(xí)慣(吸煙、嗜酒、缺乏體育鍛煉)，以及糖尿病、高血壓、高膽固醇等一些慢性疾病。在多種心血管疾病中，動(dòng)脈粥樣硬化是其共同的病理生理學(xué)過(guò)程。

動(dòng)脈粥樣硬化是一種由脂質(zhì)潴留在動(dòng)脈壁形成以斑塊為特征的慢性血管炎性疾病，許多研究發(fā)現(xiàn)血管內(nèi)皮損傷是其形成的始動(dòng)因素。血管內(nèi)皮細(xì)胞(Endothelial cell,EC)是一層連續(xù)覆蓋在血管腔內(nèi)表面的扁平鱗狀細(xì)胞，對(duì)血管內(nèi)皮功能起著重要的調(diào)控作用。當(dāng)存在糖尿病、血脂和血流動(dòng)力學(xué)異常等刺激時(shí)，EC受損發(fā)生功能紊亂(Endothelialcell dysfunction,ECD)，包括局部滲透增強(qiáng)、俘獲和修飾循環(huán)血中的脂蛋白顆粒、選擇性募集單核細(xì)胞進(jìn)入內(nèi)膜下分化成巨噬細(xì)胞并將修飾的脂蛋白內(nèi)化成為泡沫細(xì)胞，同時(shí)，誘導(dǎo)相鄰的平滑肌細(xì)胞增殖和遷移覆蓋在壞死核心表面形成斑塊。隨著斑塊內(nèi)炎癥環(huán)境的加劇和纖維帽的降解，最終斑塊破裂，引發(fā)嚴(yán)重的CVD事件。

N6-甲基腺苷(m6A)作為一種轉(zhuǎn)錄后表位剪切修飾，是真核生物的信使RNA(mRNA)中最豐富的修飾之一。甲基轉(zhuǎn)移酶復(fù)合物(METTL3,METTL14,WTAP和KIAA1429)可以增加mRNA的m6A修飾，去甲基酶(FTO和ALKBH5)可以降低mRNA的m6A修飾，同時(shí)，這些發(fā)生m6A修飾的mRNA可被識(shí)別蛋白(YTHDF1-3,YTHDC1-2，和HNRNP家族蛋白)識(shí)別和結(jié)合。m6A甲基化的不同轉(zhuǎn)錄后結(jié)果依賴于其識(shí)別蛋白。YTHDF2(YTH domain family 2)是最有效的m6A閱讀器，通過(guò)識(shí)別含有m6A的mRNA并將其分配到加工體，削弱了mRNA的穩(wěn)定性。

RNA干擾(RNA interference，RNAi)指的是，將與mRNA對(duì)應(yīng)的正義RNA和反義RNA組成的雙鏈RNA(dsRNA)導(dǎo)入細(xì)胞，可以使mRNA發(fā)生特異性的降解，導(dǎo)致其相應(yīng)的基因沉默的現(xiàn)象。由于使用RNAi技術(shù)可以特異性剔除或關(guān)閉特定基因的表達(dá)，所以該技術(shù)已被廣泛用于探索基因功能和傳染性疾病及惡性腫瘤的基因治療領(lǐng)域。小干擾RNA(siRNA)，有時(shí)稱為短干擾RNA或沉默RNA，是一類雙鏈RNA分子，長(zhǎng)度為20-25個(gè)堿基對(duì)，類似于miRNA，并且在RNA干擾(RNAi)途徑內(nèi)操作。它干擾了表達(dá)與互補(bǔ)的核苷酸序列的特定基因的轉(zhuǎn)錄后降解的mRNA，從而防止翻譯。

目前，已有文獻(xiàn)報(bào)道YTHDF2在腫瘤、造血干細(xì)胞(HSCs)內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定和造血再生的調(diào)節(jié)中發(fā)揮作用，然而，YTHDF2在心血管疾病中的作用及其機(jī)制目前尚未有任何相關(guān)的研究和報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)上述問(wèn)題，本申請(qǐng)?zhí)峁┮环N下調(diào)YTHDF2蛋白表達(dá)的物質(zhì)及其在制備治療心血管疾病藥物中的應(yīng)用。

首先，本申請(qǐng)?zhí)峁┝艘环N下調(diào)YTHDF2蛋白表達(dá)的物質(zhì)，包括基于YTHDF2的小干擾RNA和YTHDF2 shRNA的內(nèi)皮特異性腺相關(guān)病毒。