[發(fā)明專利]清腦復(fù)神液高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202110037888.6
• 申請日: 2021-01-12
• 公開（公告）號: CN114764090A
• 公開（公告）日: 2022-07-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳志釗;殷瑋;周蘭華;張志堅(jiān);宮劍平;戚園梅;彭佳裕
• 申請（專利權(quán)）人: 廣州白云山花城藥業(yè)有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/02;G01N30/86
• 代理公司: 廣州三環(huán)專利商標(biāo)代理有限公司 44202
• 代理人: 程躍華

本發(fā)明涉及清腦復(fù)神液高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法，采取清腦復(fù)神液中10種有效成分葛根素、芍藥苷、柚皮苷、橙皮苷、黃芩苷、小檗堿、細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷、黃芩素、大黃素、大黃酚濃度的高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法。包括以下步驟：(1)儲備液的制備：各有效成分分別溶解于100％甲醇溶液中，制得標(biāo)準(zhǔn)品儲備溶液；(2)待測樣品溶液的制備；(3)將步驟(2)所得待測樣品溶液進(jìn)行液相色譜分離及質(zhì)譜分析。本發(fā)明的檢測方法色譜峰形極佳，每個(gè)化合物的通道都只有唯一的目標(biāo)峰，操作簡單、分析快速、特異性高、分離度高。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及藥物分析技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及清腦復(fù)神液高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法，更具體地，涉及清腦復(fù)神液藥物中10種主要成分濃度的高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法。

背景技術(shù)

清腦復(fù)神液載于衛(wèi)生部頒布的藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第九冊,其主方由丹參、川芎、當(dāng)歸、紅花、桃仁、赤芍、棗仁、茯苓、五味子、決明子、蓮子心、柏子仁、鉤藤、遠(yuǎn)志、半夏、桔梗、竹茹、陳皮、葛根、羌活、白芷等48味中藥組成。具有清心安神、化痰醒腦、活血通絡(luò)的作用,主治神經(jīng)衰弱、失眠、頑固性頭痛、腦震蕩后遺癥所致頭痛，眩暈，健忘、失眠等癥。作為安神類處方藥,在臨床上使用非常廣泛和頻繁。由于清腦復(fù)神液由多種中藥組成，故相關(guān)藥物的質(zhì)量控制顯得尤為重要。清腦復(fù)神液至今未收載于歷版《中國藥典》，只有廣州市藥檢所確定的標(biāo)準(zhǔn)，即對大黃酚和丹參酮IIA進(jìn)行定性的檢測。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的不明確，極大地限制了清腦復(fù)神液的使用，因此亟需針對清腦復(fù)神液中的有效成分成分建立靈敏度高、專屬性強(qiáng)、快速高效的分析方法，為清腦復(fù)神液的質(zhì)量控制和評價(jià)提供依據(jù)，為清腦復(fù)神液中的活性成分研究提供技術(shù)支持。

發(fā)明內(nèi)容

基于此，本發(fā)明的目的之一是提供清腦復(fù)神液高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法，更具體地，涉及清腦復(fù)神液中10種主要成分葛根素、芍藥苷、柚皮苷、橙皮苷、黃芩苷、小檗堿、細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷、黃芩素、大黃素、大黃酚的濃度的高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法，該檢測方法操作簡單、分析快速、特異性高、分離度高。

根據(jù)清腦復(fù)神液的四十八味中藥原料，我們選取其中含有明確有效成分的部分中藥，將其有效成分單體作為檢測對象，我們選取葛根素、芍藥苷、柚皮苷、橙皮苷、黃芩苷、小檗堿、細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷、黃芩素、大黃素、大黃酚作為檢測對象，并采取高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法。

具體技術(shù)方案如下：

清腦復(fù)神液高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法，采取清腦復(fù)神液中10種有效成分葛根素、芍藥苷、柚皮苷、橙皮苷、黃芩苷、小檗堿、細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷、黃芩素、大黃素、大黃酚濃度的高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法，包括以下步驟：

(1)儲備溶液的制備：

取標(biāo)準(zhǔn)品葛根素、芍藥苷、柚皮苷、橙皮苷、黃芩苷、小檗堿、細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷、黃芩素、大黃素、大黃酚，分別溶解于100％甲醇溶液中，制得標(biāo)準(zhǔn)品儲備溶液；將標(biāo)準(zhǔn)品儲備溶液混合，得到混合標(biāo)準(zhǔn)品儲備溶液；

(2)工作溶液的制備：

分別用40±5％乙腈水溶液稀釋所述混合標(biāo)準(zhǔn)品儲備溶液，制得混合標(biāo)準(zhǔn)曲線樣本工作溶液和混合質(zhì)控樣本工作溶液；

(3)待測樣品溶液的制備：

待測樣品溶液的制備：取清腦復(fù)神液，加入適量的40±5％乙腈水溶液稀釋到合適的濃度，渦旋混勻，之后過0.22μm的微孔濾膜，濾液即為待測樣品進(jìn)樣溶液；

(4)將步驟(3)所得待測樣品溶液進(jìn)行液相色譜分離；將液相色譜分離后的樣品進(jìn)行質(zhì)譜分析。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果：