[發明專利]一種用于檢測鼠疫耶爾森菌的熒光PCR試劑及方法在審
| 申請號: | 202110034632.X | 申請日: | 2021-01-12 |
| 公開(公告)號: | CN112609013A | 公開(公告)日: | 2021-04-06 |
| 發明(設計)人: | 黎紹基;林鏡中;黃俊輝;朱碧瑩;劉鈺涵 | 申請(專利權)人: | 深圳市賽格諾生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/689 | 分類號: | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 518104 廣東省深圳市寶安*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 用于 檢測 鼠疫 耶爾森菌 熒光 pcr 試劑 方法 | ||
1.一種用于檢測鼠疫耶爾森菌的熒光PCR試劑,含有Tris-HCl緩沖液、氯化鉀、氯化鎂、dNTPs、Taq DNA聚合酶,其特征在于,還含有下述用于檢測鼠疫耶爾森菌dam基因和pla基因的引物探針組合:
檢測dam基因的正向引物序列為5’-ATCCAGCCGAAAACCAGTTGT-3’,反向引物的序列為5’-GGCGCGGAAATTAGTCATCA-3’,探針的序列為5’-TCGCGCCAGCAGAACCAAATCC-3’,所述的探針的5’端和3’端分別用熒光報告基團和熒光淬滅基團修飾;
檢測pla基因的正向引物的序列為5’-GTTAATACCAAATATATCCCCTGACAGC-3’,反向引物的序列為5’-TTCTTCCTGTTTCTGCGTCATAAAG-3’,探針的序列為5’-TACAGTTGCAGCCTCCA-3’,所述的探針的5’端和3’端分別用熒光報告基團和MGB基團修飾。
2.權利要求1所述的一種用于檢測鼠疫耶爾森菌的熒光PCR試劑,其特征在于,還可添加凍干賦形劑,凍干在可直接用于上機的PCR反應管或由其組合成的多連管中。
3.一種用于檢測鼠疫耶爾森菌的方法,包括樣本核酸提取、鼠疫耶爾森菌核酸檢測和結果分析三個主要步驟,其特征在于,使用權利要求1或2所述的用于檢測鼠疫耶爾森菌的熒光PCR試劑進行鼠疫耶爾森菌核酸檢測。
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