[發明專利]餌料綠藻營養活性的比色檢測方法

在審

• 申請號: 202110034014.5
• 申請日: 2021-01-12
• 公開（公告）號: CN112608974A
• 公開（公告）日: 2021-04-06
• 發明（設計）人: 趙文;王宇;魏杰;張灣;潘立峰
• 申請（專利權）人: 大連海洋大學
• 主分類號: C12Q1/06
• 分類號: C12Q1/06;C12R1/89
• 代理公司: 大連非凡專利事務所 21220
• 代理人: 閃紅霞

本發明公開一種餌料綠藻營養活性的比色檢測方法，是利用綠藻攝食葡萄糖的特性，將葡萄糖氧化顯色與碘量法測葡萄糖方法優化結合并將檢測條件限定為較高的堿性，使藻類在堿性環境中無法存活而沉降，進而取上清液進行顯色，避免綠藻本身具有顏色對葡萄糖顯色的影響，可有效地通過顯色來反映餌料藻的生長狀況，進而迅速比對出鮮活藻液的細胞密度，從而確定綠藻的營養活性，無需養殖經驗及血細胞計數儀等設備，具有操作簡單、檢測效率高等優點。

技術領域

本發明涉及一種餌料綠藻營養活性的檢測方法，尤其是一種餌料綠藻營養活性的比色檢測方法。

背景技術

綠藻門是藻類中最龐大的一個門，種類繁多，分布極廣，約90%生于淡水，僅約10%的種類在海水中生活。綠藻用途廣泛，浮游種類如小球藻屬、扁藻屬、杜氏藻屬等是海產經濟動物幼體的重要餌料。實驗表明餌料綠藻處于細胞活性強的指數生長期時，總脂肪含量和不飽和脂肪酸含量等營養成分高于衰亡期，故若投喂已經處于衰亡期的藻類，不僅會因養殖生物不攝食、營養活性低而影響生物生長，而且還會增加殘餌量導致水質惡化，造成經濟損失。然而，目前對于水產養殖業餌料綠藻管理，往往是通過顯微鏡觀察活體狀態、通過經驗目測或血細胞計數板顯微計數等方式測得藻類數量，無法準確地分析出綠藻的營養活性。

發明內容

本發明是為了解決現有技術所存在的上述技術問題，提供一種餌料綠藻營養活性的比色檢測方法。

本發明的技術解決方案是：一種餌料綠藻營養活性的比色檢測方法，其特征在于按照如下步驟進行：

a. 向餌料綠藻藻液中加入無水葡萄糖并搖勻，封口后20~25℃下靜置光照培養2h得培養液，所述藻液與無水葡萄糖的用量比為150ml：1.5g；

b. 取25ml培養液，加入5ml濃度為0.05mol/L的碘標準溶液及2ml濃度為2mol/L的氫氧化鈉水溶液，搖勻后密封暗處理10~15min；

c. 向液體中加入1ml濃度為6mol/L的鹽酸、25ml濃度為0.1mol/L的硫代硫酸鈉水溶液及1ml質量分數為0.01的淀粉指示劑，搖勻；再加入2ml濃度為2mol/L的氫氧化鈉水溶液及3ml濃度為0.5g/L的靛藍胭脂紅水溶液，靜置兩小時；

d. 以上清液體顏色與比色卡對比，確定餌料綠藻營養活性；所述比色卡是培養不同濃度梯度對應的鮮活藻液，按照步驟a~c操作后，按照濃度梯度對應的顏色制備而成。

本發明利用綠藻攝食葡萄糖的特性，將葡萄糖氧化顯色與碘量法測葡萄糖方法優化結合并將檢測條件限定為較高的堿性，使藻類在堿性環境中無法存活而沉降，進而取上清液進行顯色，避免綠藻本身具有顏色對葡萄糖顯色的影響，可有效地通過顯色來反映餌料藻的生長狀況，進而迅速比對出鮮活藻液的細胞密度，從而確定綠藻的營養活性，無需養殖經驗及血細胞計數儀等設備，具有操作簡單、檢測效率高等優點。

附圖說明

圖1是本發明以鮮活小球藻為藻液d步驟按照濃度由高至低拍攝的圖片。

圖2是以圖1所示圖片顏色制作的比色卡。

圖3是本發明以鮮活扁藻為藻液d步驟按照濃度由高至低拍攝的圖片。

圖4是以圖3所示圖片顏色制作的比色卡。

圖5是本發明以鮮活鹽藻為藻液d步驟按照濃度由高至低拍攝的圖片。

圖6是以圖5所示圖片顏色制作的比色卡。

具體實施方式

本發明的一種餌料綠藻營養活性的比色檢測方法，按照如下步驟進行：