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[發明專利]一種幾丁質內切酶CmChi4及其克隆表達與應用在審

專利信息
申請號: 202110021973.3 申請日: 2021-01-08
公開(公告)號: CN112941054A 公開(公告)日: 2021-06-11
發明(設計)人: 陳可泉;陳雪曼;張阿磊;陳燕;周寧;魏國光;歐陽平凱 申請(專利權)人: 南京工業大學
主分類號: C12N9/42 分類號: C12N9/42;C12N15/56;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/26;C12P19/14;C12R1/19
代理公司: 南京先科專利代理事務所(普通合伙) 32285 代理人: 繆友菊
地址: 210000 江蘇省南京市*** 國省代碼: 江蘇;32
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 一種 幾丁質 內切酶 cmchi4 及其 克隆 表達 應用
【權利要求書】:

1.一種幾丁質內切酶CmChi4,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。

2.根據權利要求1所述的幾丁質內切酶CmChi4,其特征在于,編碼幾丁質內切酶CmChi4的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

3.一種重組質粒,其特征在于,含有編碼權利要求1所述的幾丁質內切酶CmChi4的核苷酸序列。

4.一種重組菌株,其特征在于,表達權利要求3所述重組質粒的菌株。

5.基于權利要求4所述的重組菌株的構建方法,其特征在于,包括以下步驟:

步驟1,設計引物,PCR擴增SEQ ID NO:1所示的序列;

步驟2,構建重組質粒pCOLDI-CmChi4

步驟3,將得到的重組質粒pCOLDI-CmChi4導入大腸桿菌BL21(DE3),得到含有重組質粒pCOLDI-CmChi4的大腸桿菌BL21(DE3),命名為重組菌;

步驟4,挑選重組菌的單克隆,搖床過夜培養后,加入誘導劑誘導培養,離心后收集菌體;

步驟5,向細菌沉淀中加入緩沖液重懸細胞,再超聲裂解后,離心收集上清后冷凍備用;

6.基于權利要求1所述的幾丁質內切酶CmChi4在降解幾丁質上的應用。

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1、專利原文基于中國國家知識產權局專利說明書;

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