[發(fā)明專利]一種用于抑制水環(huán)境副溶血弧菌的復(fù)合植物提取物及其制備方法和應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110019291.9 | 申請日： | 2021-01-07 |
| 公開（公告）號： | CN112616862B | 公開（公告）日： | 2021-08-03 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 黃錦爐 | 申請（專利權(quán)）人： | 清遠(yuǎn)海貝生物技術(shù)有限公司 |
| 主分類號： | A01N65/34 | 分類號： | A01N65/34;A01N65/12;A01N65/08;A01N63/22;C02F1/50;C02F103/20 |
| 代理公司： | 廣州正明知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 44572 | 代理人： | 張麗 |
| 地址： | 511500 廣*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 用于 抑制 水環(huán)境 溶血 弧菌 復(fù)合 植物 提取物 及其 制備 方法 應(yīng)用 | ||
1.一種用于抑制水環(huán)境副溶血弧菌的復(fù)合植物提取物，其特征在于，以重量百分比計，包括35-55%大龍珠草提取物、30-42%崗梅提取物、5-12%紫背草花提取物、5-12%蒲公英提取物；
所述大龍珠草提取物的制備方法為：
S1、將大龍珠草切短，置于45-50℃環(huán)境下烘烤6-10h，過篩獲得粉碎物，按質(zhì)量百分比計，取100份大龍珠草粉碎物，與600-1200份水充分混分，接著加入5000-15000IU纖維素酶與木瓜蛋白酶復(fù)合物，35-40℃環(huán)境中，密閉、間隔式攪拌，存置48-72h；
S2、開封，加水400-600份，加芽孢菌液態(tài)培養(yǎng)基10-18份，加芽孢菌（2-6）×105cfu，密閉、間隔式攪拌，培養(yǎng)液OD值為6.5-7.5時獲得培養(yǎng)物，將培養(yǎng)物離心去渣，收集上清液，接著將收集的上清液利用濃縮至原體積的10%-30%，所獲得的濃縮液即為所述大龍珠草提取物；
所述崗梅提取物的制備方法為：
S1、崗梅在3.0-4.5mmol/L的氫氧化鈉溶液中進行一過性浸泡，浸泡持續(xù)時間為5-10秒，取出，置于環(huán)境溫度30-35℃烘干，獲得預(yù)處理崗梅薄片；
S2、將預(yù)處理崗梅薄片過篩獲得崗梅初微粉，將崗梅初微粉、水與芽孢液態(tài)培養(yǎng)基和芽孢菌混合，35-40℃密閉培養(yǎng)至OD值為5.5-6.5得到培養(yǎng)物，離心去渣，收集上清液，滅菌，冷卻后取出，并將經(jīng)高溫滅菌的上清液濃縮至原體積的10%-25%，獲得濃縮液即為所述的崗梅提取物，其中，崗梅初微粉：水：芽孢菌液態(tài)培養(yǎng)基的重量體積比為1：（6-12）：（2-4），芽孢菌的加入量為每質(zhì)量份崗梅初微粉加入（3-8）×106cfu；
所述紫背草花提取物的制備方法為：
S1、將經(jīng)過預(yù)處理的紫背草花去雜除塵，再經(jīng)速凍、預(yù)膨化、真空脫油處理，獲得紫背草花脫水干燥物，干燥物過篩進行粉碎，獲得紫背草花粉碎物；
S2、將紫背草花粉碎物：水：芽孢液態(tài)培養(yǎng)基和芽孢菌混合，35-40℃密閉培養(yǎng)至OD值為4.0-6.5得到培養(yǎng)物，過濾收集培養(yǎng)物，3000-5000rpm離心20-30min，棄離心上清液，收集離心沉積物，并以離心沉積物的6-10倍質(zhì)量份加水充分溶解，接著分裝密閉，并于121℃下高壓滅菌15min，冷卻后取出，800-1200rpm離心5-10min，去渣留離心上清液，將收集的上清液濃縮至原體積的10%-25%，獲得濃縮液即為所述的紫背草花提取物；其中，紫背草花粉碎物：水：芽孢液態(tài)培養(yǎng)基按重量體積比1：（6-12）：（2-4）進行混合，芽孢菌的加入量為每質(zhì)量份紫背草花粉碎物加入（3-8）×106cfu；
所述蒲公英提取物的制備方法為：
S1、按質(zhì)量份計，取蒲公英100份，烘干至含水量≤4%，文火煎炒30-60min，過20目篩獲得蒲公英初微粉，將蒲公英初微粉與600-800份水充分混分，接著加入5000-9000IU纖維素酶，35-40℃環(huán)境中，密閉、間隔式攪拌，存置48-72h；
S2、開封，加水400-500份，加芽孢菌液態(tài)培養(yǎng)基10-18份，加芽孢菌（2-6）×105cfu，密閉、間隔式攪拌，培養(yǎng)液OD值為6.2-7.2時獲得培養(yǎng)物，將培養(yǎng)物離心去渣，收集上清液，接著將收集的上清液濃縮至原體積的10%-30%，所獲得的濃縮液即為所述蒲公英提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于抑制水環(huán)境副溶血弧菌的復(fù)合植物提取物，其特征在于，以重量百分比計，包括45%大龍珠草提取物、38%崗梅提取物、9%紫背草花提取物、8%蒲公英提取物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1至2任一項所述的用于抑制水環(huán)境副溶血弧菌的復(fù)合植物提取物，其特征在于，所述濃縮條件為：溫度25-30℃，操作壓力為0.3-0.6Mpa，超濾膜的膜通量以50-100L/m2·h。
4.權(quán)利要求1至2任一項所述復(fù)合植物提取物的制備方法，其特征在于，在25-30℃下，將各組分按比例混合，超聲波乳化均勻，所獲得的混合液為復(fù)合植物提取物。
5.權(quán)利要求1至2任一項所述復(fù)合植物提取物的應(yīng)用，其特征在于，所述復(fù)合植物提取物用于抑制養(yǎng)殖水體上層、中層和底層的副溶血弧菌的異常繁殖。
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