[發明專利]一種快速檢測蜂蜜中脯氨酸含量的試劑盒

有效

• 申請號: 201410619143.0
• 申請日: 2014-11-07
• 公開（公告）號: CN104359900A
• 公開（公告）日: 2015-02-18
• 發明（設計）人: 張金彪;張素平;周碧青
• 申請（專利權）人: 福建農林大學
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

技術領域

本發明具體涉及一種快速檢測蜂蜜中脯氨酸含量的試劑盒及其使用方法,屬于食品質量安全檢測技術領域。

背景技術

蜂蜜中雖然含有很多種氨基酸，然而只有脯氨酸才能作為衡量蜂蜜質量的指標之一。蜂蜜中脯氨酸的含量比總酚及總黃酮的還要高，并且脯氨酸的含量與酚類化合物濃度成正比。因此，脯氨酸不僅具有抗氧化性，可以用來衡量蜂蜜的抗氧化性，而且也可以為檢測蜂蜜質量指標提供科學依據。目前國內外檢測蜂蜜中脯氨酸含量的方法主要有分光光度法和色譜法。以上方法雖然較準確，但耗時，并且對設備和檢測人員的技術要求較高，無法在基層部門得到廣泛應用。因此，本發明在前人對蜂蜜中脯氨酸含量檢測技術研究的基礎上，通過優化顯色體系中各組成成分的濃度和體積，制備了試劑盒及包含多種顏色的脯氨酸標準比色卡，旨在建立一種對蜂蜜中的脯氨酸含量進行簡單、快速測定的方法。

發明內容

本發明的目的是在于提供一種快速檢測蜂蜜中脯氨酸含量的試劑盒及其使用方法，能夠現場完成對蜂蜜中脯氨酸的快速測定，具有所用顯色體系穩定、操作簡便、快速的特點。

為實現上述目的，本發明的技術方案為：?

一種快速檢測蜂蜜中脯氨酸含量的試劑盒，由試劑Ⅰ和試劑Ⅱ組成；所述試劑Ⅰ由茚三酮、甲酸和乙二醇甲醚組成，所述試劑Ⅱ由丙酮組成。

所述試劑Ⅰ中茚三酮的濃度為2wt.%，甲酸和乙二醇甲醚的體積比為1:1。

快速檢測蜂蜜中脯氨酸含量的試劑盒的使用方法，包括以下步驟：

（1）樣品的制備：稱取2.5g蜂蜜樣品于小燒杯中，加入10mL蒸餾水攪勻后，用玻璃棒將其轉入50mL的容量瓶，加蒸餾水定容至刻度，搖勻；

（2）顯色：取1.00mL待測樣品于具塞刻度試管中，然后向試管中加入1.0mL試劑Ⅰ，塞緊瓶蓋，放在沸水中加熱15min后馬上取出，加入5mL試劑Ⅱ顯色5min。

（3）檢測:?通過顯色后溶液的顏色與比色卡的顏色對比，確定出脯氨酸的含量值。

上述步驟（2）中所述的比色管為25mL具塞比色管，管徑2cm,?管高15?cm;?上述步驟（3）中所述的比色卡，在常溫下，將一系列脯氨酸標準工作溶液按上述中所述的步驟顯色，根據所獲顏色，制成比色卡，比色卡對應的脯氨酸含量范圍為0-50?(mg/100g)。

本發明的有益效果：本發明研制的蜂蜜中脯氨酸含量快速檢測的試劑盒和方法，其顯著特點是：1.?顯色體系穩定，通過篩選，把國家標準方法中所使用的異丙醇換成丙酮后，有效克服了之前顯色體系不穩定的缺點，從而大大提高了檢測的準確性；2.?本發明借助比色卡對照檢測，不需要分光光度計等儀器設備，操作簡便，便于現場檢測；3.?本方法快速、操作簡便。該方法適合于現場快速檢測蜂蜜中的脯氨酸含量，是快速判斷蜂蜜產品質量水平的重要依據之一。

具體實施方式：

實施例1：

比色卡的制作方法

（1）標準溶液的制備：準確吸取25μg/mL脯氨酸標準溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL(相當于蜂蜜中脯氨酸的含量分別為0、10、20、30、40、50?mg/100g)到六支具塞刻度試管中，加蒸餾水補足體積到lmL;

（2）顯色：向試管中加入1.0mL試劑Ⅰ，塞緊瓶蓋，放在沸水中加熱15min后馬上取出，加入5mL試劑Ⅱ顯色5min。根據所獲顏色，制成比色卡，比色卡對應的脯氨酸的含量范圍為0-50?(mg/100g)。

實際樣品測定

（1）樣品的制備：稱取2.5g龍眼蜜于小燒杯中，加入10mL蒸餾水攪勻后，用玻璃棒將其轉入50mL的容量瓶，加蒸餾水定容至刻度，搖勻；

（2）顯色：取1.00mL待測樣品于具塞刻度試管中，然后向試管中加入1.0mL試劑Ⅰ，塞緊瓶蓋，放在沸水中加熱15min后馬上取出，加入5mL試劑Ⅱ顯色5min;

（3）檢測:?通過顯色后溶液的顏色與比色卡的顏色對比，其顏色介于脯氨酸含量為10?(mg/100g)和20?(mg/100g)的色澤之間，故確定蜂蜜樣品中的脯氨酸含量為15?(mg/100g)。

實施例2：

比色卡的制作方法（同實例1）

實際樣品測定

（1）樣品的制備：稱取2.5g野桂花蜜于小燒杯中，加入10mL蒸餾水攪勻后，用玻璃棒將其轉入50mL的容量瓶，加蒸餾水定容至刻度，搖勻；