[發明專利]脊髓亞急性聯合變性病模型的制備方法

有效

• 申請號: 202110003030.8
• 申請日: 2021-01-04
• 公開（公告）號: CN112616776B
• 公開（公告）日: 2022-04-29
• 發明（設計）人: 孫雅迪;韓超;徐巖;黃金莎;熊念;王濤
• 申請（專利權）人: 王濤
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02;A61D7/00
• 代理公司: 武漢信合紅谷知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 42264
• 代理人: 蔣明

本發明公開了脊髓亞急性聯合變性病模型的制備方法，包括將10μl的六氯丁二烯稀釋到490μl玉米油當中；按照150?250μl/只小鼠的劑量，對小鼠進行灌胃或腹腔注射，用藥期間正常進行飼養；間隔48小時再次進行灌胃或腹腔注射，共計給藥三次；對小鼠進行測試，觀察是否出現脊髓亞急性聯合變性病的臨床癥狀，包括以下幾種方式：用藥期間對小鼠的體重，每隔24小時進行測試并且記錄，對小鼠進行行為學評測，評測內容包括但不限于：步態、爬桿、轉棒和線柵實驗，用藥完成后測量小鼠血清維生素B₁₂的含量。通過上述設置，使用六氯丁二烯能夠在6天內完成脊髓亞急性聯合變性病模型的制備方法，且由于六氯丁二烯的售價低廉，因此本申請的制備方式相對于傳統制備方式具有速度快和成本低的優點。

技術領域

本發明涉及醫學生物學技術領域，具體為脊髓亞急性聯合變性病模型的制備方法。

背景技術

脊髓亞急性聯合變性簡稱亞急性聯合變性，是由于維生素B₁₂的攝入、吸收、結合、轉運或代謝障礙導致體內維生素B₁₂含量不足而引起的中樞和周圍神經系統變性的疾病。病變主要累及脊髓后索、側索及周圍神經等，臨床表現為雙下肢深感覺缺失、感覺性共濟失調、痙攣性癱瘓及周圍性神經病變等，常伴有貧血的臨床征象。

為了更好的對脊髓亞急性聯合變性進行良好的研究，需要建立相應的動物模型。動物疾病模型主要用于實驗生理學、實驗病理學和實驗治療學（包括新藥篩選）研究。借助于動物模型的間接研究，可以有意識地改變那些在自然條件下不可能或不易排除的因素，以便更準確地觀察模型的實驗結果并與人類疾病進行比較研究，有助于更方便、更有效地認識人類疾病的發生發展規律，研究防治措施。

現有的脊髓亞急性聯合變性病動物模型的制備方式如下：通過在基因層面的操作，使得小鼠無法完成對維生素B₁₂的攝取，從而使得小鼠體內維生素B₁₂的含量不足，進而引發脊髓亞急性聯合變性病。然而，這種制備方式用到的轉基因小鼠價格昂貴并且在國內沒有售賣，同時考慮到其制備周期在兩個月左右，因此該制備方法具有制備時間長和制備成本高的缺點。

因此，急需一種能夠快速且低成本制備脊髓亞急性聯合變性病模型的方法。

發明內容

本發明的目的在于提供脊髓亞急性聯合變性病模型的制備方法，通過六氯丁二烯能夠在6天內完成脊髓亞急性聯合變性病模型的制備方法，且由于六氯丁二烯的售價低廉，因此本申請的制備方式相對于傳統制備方式具有速度快和成本低的優點。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：脊髓亞急性聯合變性病模型的制備方法，包括以下步驟：

S1、將10μl的六氯丁二烯稀釋到490μl食用油當中；

S2、按照50-250μl/只小鼠的劑量，對小鼠進行灌胃或腹腔注射，用藥期間正常進行飼養；

S3、間隔48小時再次進行灌胃或腹腔注射，共計給藥三次；

S4、在第三次給藥24小時后對小鼠進行測試，觀察是否出現脊髓亞急性聯合變性病的臨床癥狀。

優選的，所述食用油為玉米油。

優選的，S4步驟包括以下內容：用藥期間對小鼠的體重，每隔24小時進行測試并且記錄。

優選的，S4步驟包括以下內容：對小鼠進行行為學評測，評測內容包括但不限于：步態、爬桿、轉棒和線柵實驗。

優選的，用藥完成后測量小鼠血清維生素B₁₂的含量。

與現有技術相比，本發明的有益效果是：