[發明專利]用于純化單克隆抗體的方法

在審

• 申請號: 202080072139.0
• 申請日: 2020-08-06
• 公開（公告）號: CN114555794A
• 公開（公告）日: 2022-05-27
• 發明（設計）人: T·納吉;J·黑格;C·黑斯;A·托平;J·普倫
• 申請（專利權）人: 富士膠片戴奧辛思生物技術英國有限公司
• 主分類號: C12N7/04
• 分類號: C12N7/04;C07K1/16;C07K1/34;C07K1/36;B01D15/36;B01D15/38;B01D61/14;G01N30/34
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 李進;李唐

用于純化包含單克隆抗體和雜質的液體原料的方法，所述方法包括使所述液體原料通過包含至少兩個加工單元的儀器，每個這樣的單元生產含有純化的單克隆抗體的產物流和任選的包含至少一些所述雜質的廢物流，其中每個單元包含規定的組件(i)至(v)，其包括多入口流量控制器，該多入口流量控制器包括兩個或多個可變流量入口閥，用于通過以期望的比例組合至少兩種液體來原位生產生物加工液體。一個單元進行色譜法，而另一個進行病毒滅活。除了它們包含的設備之外，單元可以基本上相同，導致在簡單性、成本和操作容易性、較低的操作者錯誤風險、較容易維護和較低的備件庫存方面的優點。

本發明涉及純化單克隆抗體的方法。

單克隆抗體(“mAb”)近年來吸引了許多關注，特別是對于治療應用。mAb通常通過培養重組宿主細胞來生產，所述重組宿主細胞已經被工程化以表達所需mAb。然后通過通常包括許多加工操作(有時稱為“單元操作”)的方法從培養基中回收mAb。

用于純化mAb的儀器在本領域中是已知的，并且通常包含許多非常不同的串聯布置的加工單元，其中每個單元進行單獨的加工操作。加工單元通常包括至少兩個泵以使液體移動通過該單元。通常，這些單元由不同的制造商提供，這些制造商專門用于進行特定的加工操作(例如，過濾、色譜法等)的設備。用于mAb的商業規模制造的儀器體積非常大，并且需要大量的占地面積和基礎設施。另外，雖然可以對幾個加工操作實現加工單元的一些通用性，用于某些單元操作(例如病毒滅活和/或超濾)的單元設計與例如色譜純化的那些單元設計顯著不同。這意味著需要更多的空間來容納兩組或更多組加工單元，或者用于各階段的儀器的互操作性和控制非常復雜。此外，操作者需要對所采用的不同類型的加工單元中的每一個進行廣泛訓練，因為這些單元彼此如此不同。目前用于mAb制造的許多加工單元之間缺乏相似性意味著需要大量備件庫存。再進一步地，許多單元之間缺乏相似性使得例行維護變得復雜，因為工程師需要學習如何維修結構非常不同的加工單元。如果在錯誤的階段提供錯誤的、外部制備的生物加工液體，則需要用于不同的加工操作的不同的生物加工液體(例如緩沖液、洗脫劑等)的儀器也存在操作者錯誤的巨大風險，潛在地存在高價批次的mAb失敗的風險。因此需要簡化的且廣泛適用的儀器，其具有較低的操作者錯誤風險。

根據本發明的第一方面，提供了用于純化包含單克隆抗體(mAb)和雜質的液體原料的方法，所述方法包括使所述液體原料通過包含至少兩個加工單元的儀器，每個這樣的單元生產含有純化的單克隆抗體的產物流和任選的包含至少一些所述雜質的廢物流，其中每個單元包含以下組件(i)至(v)：

(i)用于所述液體原料的入口；

(ii)多個入口流量控制器，其包含兩個或更多個可變流量入口閥，用于由將以期望的比率組合的至少兩種其它液體來生產生物加工液體；

(iii)用于將所述液體原料與所述生物加工液體組合以生產設備進料和/或用于將所述至少兩種其它液體組合以制備所述生物加工液體的裝置；

(iv)用于對所述液體原料或對所述設備進料進行加工操作的設備，所述設備包含用于所述設備進料和/或所述液體原料的入口和用于產物流的出口；和

(v)用于賦予所述液體原料、所述至少兩種液體、所述生物加工液體、所述設備進料、所述產物流和所述任選的廢物流的流的裝置；

其中：

(I)所述液體原料通過入口(i)進料并且在所述裝置(iii)中與所述生物加工液體組合，并隨后通過所述設備(iv)進料或在所述設備(iv)中與所述生物加工液體組合，在任一情況下，以得到離開所述單元的所述產物流和任選的廢物流；

(II) 所述單元串聯布置，使得用于所述第二單元和任何后續單元的所述液體原料包含來自前面的單元的所述產物流；

(III) 在至少兩個加工單元的至少一個中的設備(iv)進行色譜法的加工操作；和

(IV) 在至少兩個加工單元的至少一個中的設備(iv)進行病毒滅活的加工操作。

本發明提供了可以在制造規模上進行的方法，并且提供了優于現有方法的許多優點，特別是在簡單性、成本和操作容易性、較低的操作者錯誤風險、較容易維護和較低的備件庫存方面。