[發明專利]純化方法

在審

• 申請號: 202080014339.0
• 申請日: 2020-02-14
• 公開（公告）號: CN113423832A
• 公開（公告）日: 2021-09-21
• 發明（設計）人: 喬爾喬斯·派特索斯
• 申請（專利權）人: 雷沃盧金有限公司
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10
• 代理公司: 中科專利商標代理有限責任公司 11021
• 代理人: 柴云峰;張瑩

1.一種從樣品分離核酸的濾器，所述濾器至少包括第一多孔區域和第二多孔區域，第一多孔區域布置成使用時與第二多孔區域之前的樣品接觸，其中第一多孔區域具有大于第二多孔區域的標稱孔徑。

2.根據權利要求1所述的濾器，其中第二多孔區域的標稱孔徑是0.5μm至1.8μm。

3.根據權利要求1或權利要求2所述的濾器，其中第二多孔區域的標稱孔徑是0.5μm至1.3μm。

4.根據權利要求1至3中任一項所述的濾器，其中第一多孔區域的標稱孔徑是2μm至3μm。

5.根據前述權利要求中任一項所述的濾器，其中所述濾器裝置包含多個第一多孔區域。

6.根據前述權利要求中任一項所述的濾器，其中所述濾器還包括第三多孔區域，第三多孔區域布置成使用時與第二多孔區域之后的樣品接觸，第三多孔區域具有大于第二多孔區域的標稱孔徑。

7.根據權利要求6所述的濾器，其中第三多孔區域的標稱孔徑基本上等于第一多孔區域的標稱孔徑。

8.根據前述權利要求中任一項所述的濾器，其包含硅酸鹽，任選地其中第一、第二和任選地第三多孔區域中至少一個包含硅酸鹽，任選地進一步其中所述濾器由硅酸鹽構成。

9.根據權利要求8所述的濾器，其中所述硅酸鹽包括硅酸鹽玻璃。

10.根據權利要求9所述的濾器，其中所述硅酸鹽玻璃包括或是硼硅酸鹽玻璃。

11.根據前述權利要求中任一項所述的濾器，其中第一多孔區域和第二多孔區域由纖維材料形成。

12.根據權利要求11所述的濾器，其中第一多孔區域和第二多孔區域各自由不同的纖維材料形成。

13.根據任何前述權利要求所述的濾器，其中如按樣品流過濾器的方向測量的濾器厚度是1000μm至2000μm。

14.根據任何前述權利要求所述的濾器，其中如按樣品流過濾器的方向測量的濾器厚度是1500μm至2000μm。

15.核酸提取柱，其包含根據權利要求1-14中任一項所述的從樣品分離核酸的濾器。

16.使用根據任何前述權利要求的濾器從樣品分離核酸的方法，任選地其中所述方法包括：

(i)使包含核酸的樣品與醇和鹽接觸；

(ii)使根據權利要求1至14中任一項所述的濾器與包含在步驟(i)后獲得的核酸的組合物接觸，以提供具有與其結合的核酸的濾器；

iii)優選地，用包含醇的洗滌液處理具有與其結合的核酸的濾器；并且

(iv)從濾器洗脫核酸的至少一部分。

17.根據權利要求16所述的方法，其中步驟(iv)包括在洗脫緩沖液中于10至100℃、優選地不超過90℃的溫度溫育濾器。

18.根據權利要求17所述的方法，其中溫度是70至90℃。

19.根據權利要求17或權利要求18所述的方法，其中步驟(iv)中的溫育持續30秒至2分鐘的時間段。

20.根據權利要求16至19中任一項所述的方法，其中在步驟(iv)中通過離心從濾器洗脫核酸。

21.根據權利要求20所述的方法，其中離心的g力是600至800g。